Characterization of a mutant rat kangaroo cell line with alterations in the cell cycle and DNA repair

Abstract

Using a positive selection system for isolating DNA replication and repair related mutants, we isolated a clone from a rat kangaroo cell line (PtK2) that has increased sensitivity to UV light. Characterization of this clone indicated normal post-replication repair after UV irradiation, and normal removal rates of cyclobutane pyrimidine dimers and pyrimidine(6-4)pyrimidone photoproducts by excision repair. However, this cell line has decreased ability to make early incisions on damaged DNA, possibly indicating a defect in preferential repair of actively transcribed genes, and a slower cell proliferation rate, including a longer S-phase. This phenotype reinforces the present notion that control of key mechanisms in cell metabolism, such as cell cycle control, repair, transcription and cell death, can be linked.Uma linhagem mutante de células de rato-canguru (PtK2) com aumento de sensibilidade à luz ultravioleta (UV) foi isolada a partir de um sistema de seleção positiva. A caracterização desta linhagem indicou que tanto a síntese translesão como o reparo-excisão das lesões mais freqüentemente induzidas por UV, dímeros de pirimidina e (6-4) pirimidina-pirimidonas, encontram-se em níveis normais. No entanto, esta linhagem apresenta uma redução no nível de incisões logo após a indução das lesões, o que poderia representar um defeito no reparo preferencial de genes ativos. Alterações na proliferação celular, com uma fase S mais longa, também foram detectadas. Este fenótipo reforça a idéia de que mecanismos de controle do metabolismo celular, como ciclo celular, reparo, transcrição e morte celular, estão interligados.