Ciência Animal Brasileira (Dec 2007)
EFFECT OF COLLING IN DIPLOID OOCYTES AFTER IN VITRO MATURATION EFEITO DO RESFRIAMENTO NA PLOIDIA DE OVÓCITOS BOVINOS MATURADOS IN VITRO
Abstract
<p class="MsoNormal">The present study aimed to verify the incidence of bovine diploid oocytes when cooled at various maturation stages. Bovine cumulus-oocyte complexes were recovered from ovaries at a local slaughterhouse and divided into five groups: control group (uncooled oocytes), 0/4 h group (oocytes cooled at 4ºC before the onset of maturation), 0/29 (composed of oocytes cooled at 29ºC before the onset of maturation), 12/4 (cooled 12 h at 4ºC after the onset of maturation), and 12/29 h group (cooled 12 h at 29ºC after the onset of maturation). the oocytes remained cooled for 45 min. in all groups, the oocytes completed 24 h maturation. Subsequently, the cumulus cells were removed, and the denuded oocytes fixed on slides and stained with aceto-orcein. No differences (P > 0.05) in the incidence of diploid metaphase ii oocytes were observed between the control group (6.0%) and oocytes cooled at 4ºC and 29ºC before (8.9% and 8.0%) and after 12 h the onset of maturation (3.9% and 0.0%). These results suggest that the nuclear stage at which bovine oocytes are cooled does not affect the incidence of diploid oocytes after 24 h maturation.</p> <p class="MsoNormal">Key-Words: Bovine, cooling, diploid, in vitro maturation, oocytes.</p> <p class="MsoNormal">O presente estudo objetivou verificar o efeito do resfriamento de ovócitos bovinos em diferentes estágios de maturação na ploidia. Ovócitos bovinos foram obtidos de ovários de abatedouro e divididos em cinco grupos: grupo-controle (ovócitos não resfriados); grupo 0/4 (ovócitos resfriados a 4ºC antes do inicio da maturação); grupo 0/29 (ovócitos resfriados a 29ºC antes do início da maturação); grupo 12/4 (ovócitos resfriados a 4ºC após doze horas de maturação); e grupo 12/29 (ovócitos resfriados a 29ºC após doze horas de maturação). Os ovócitos permaneceram resfriados por 45 minutos. Em todos os grupos os ovócitos completaram 24 horas de maturação. Em seguida, as células da corona radiata foram removidas e os ovócitos fixados em lâminas e corados com orceína acética. Não se observou diferença significativa (P>0,05) na incidência de metáfase II diplóide entre o grupo-controle (6,0%) e os grupos resfriados a 4ºC (8,9%) e 29ºC (8,0%) antes do começo da maturação e doze horas após o inicio da maturação (3,9% e 0,0%, respectivamente). Os resultados sugerem que resfriamento em diferentes períodos de maturação não afeta a ploidia de ovócitos bovinos após completarem 24 horas de maturação in vitro. </p> <p class="MsoNormal">Palavras-chaves: Bovinos, diplóide, ovócitos, maturação in vitro, resfriamento.</p>