جداسازی باکتری‌های مقاوم به فلزات سنگین از پساب‌های صنعتی و شناسایی مولکولی آنها به روش ریبوتاپینگ

Abstract

زمینه و هدف: یکی از بهترین راهکارها برای حذف فلزات سمی، استفاده از باکتری‌های مقاوم به این فلزات با فرایند پاک‌سازی زیستی می‌باشد. هدف از این پژوهش، جداسازی باکتری‌های مقاوم به قلع، مس، کروم و نیکل از پساب‌های صنعتی و شناسایی مولکولی آنها می‌باشد. مواد و روش­ها: ابتدا از کارخانه‌های آبکاری واقع در استان تهران، پساب آلوده به فلزات سنگین جمع‌آوری گردید. نمونه پساب بر روی محیط LB Agar حاوی غلظت‌های مشخص از فلزات سنگین کشت داده و باکتری‌های رشدیافته جداسازی گردید. بر روی باکتری‌های رشدیافته، حداقل غلظت مهارکننده رشد (MIC) فلزات سنگین با روش میکروبراث دایلوشن انجام شد. DNA ژنومی دوسویه با بالاترین میزان مقاومت، تخلیص و PCR با کمک پرایمرهای اختصاصی انجام شد. محصول PCR تعیین سکانس شد و ریبوتایپینگ انجام گردید. یافته­ ها: از پساب حاوی فلزات سنگین، تعداد 9 باسیل گرم مثبت و منفی و کوکوباسیل گرم منفی جداسازی گردیدند. دوسویه باسیل گرم منفی، بیشترین مقاومت نسبت به فلزات سنگین را در آزمایش MIC از خود نشان دادند. این دوسویه بر اساس نتایج تعیین توالی، تحت عناوین انتروباکتر و سودوموناس شناسایی گردیدند. نتیجه‌گیری: دوسویه با بالاترین مقاومت به چهار فلز از پساب کارخانجات آبکاری جدا شدند و به روش ارزیابی فیلوژنتیک مورد شناسایی مولکولی قرار گرفتند. می‌توان از این باکتری‌ها در تصفیه زیستی پساب‌های حاوی فلزات سنگین استفاده کرد.

Keywords

• فلزات سنگین
• باکتری
• مقاومت به فلز
• شناسایی مولکولی