Ciência Rural (Jun 2008)
Presence of multiple acid phosphatases activity in seedlings of cucumber, radish and rocket salad Presença de atividade de múltiplas fosfatases ácidas em plântulas de pepino, rabanete e rúcula
Abstract
Acid phosphatases (3.1.3.2) are a group of enzymes widely distributed in nature, which catalyze the hydrolysis of a variety of phosphate esters in the pH range of 4-6. We confirmed the presence of acid phosphatases in seedlings of cucumber (Cucumis sativus), radish (Raphanus sativus) and rocket salad (Eruca vesicaria) under different assay conditions using a rapid and simple preparation. The results showed that the optimum pH and temperature used for all species were close to 5.5 and 35°C, respectively. The enzyme was inhibited by molybdate, fluoride, azide, levamisole, orthovanadate, Zn2+ and Cu2+. Suramin had no effect on enzyme activity. The acid phosphatase from cucumber, radish and rocket salad hydrolyzed a wide variety of phosphate esters and the highest activity was observed with PPi, ATP and GTP. These results demonstrate that the enzyme investigated in this study is different from well known ester phosphate cleaving plant enzymes (apyrase and inorganic pyrophosphatases) and this preparation could be a useful tool to future toxicological studies and to study initially all isoforms of acid phosphatase.As fosfatases ácidas (3.1.3.2) são um grupo de enzimas amplamente distribuídas na natureza, as quais catalisam a hidrólise de uma variedade de ésteres de fosfato com uma variação de pH entre quatro e seis. Foi confirmada a presença de fosfatases ácidas em plântulas de pepino (Cucumis sativus), rabanete (Raphanus sativus) e rúcula (Eruca vesicaria) sob diferentes condições de ensaio usando uma preparação rápida e simples. Os resultados mostraram que o pH e a temperatura ótimos para todas as espécies foram 5,5 e 35°C, respectivamente. A enzima foi inibida por molibdato, fluoreto, azida, levamisole, ortovanadato, Zn2+ e Cu2+. O inibidor suramim não afetou a atividade enzimática. As fosfatases ácidas de pepino, rabanete e rúcula hidrolisaram uma ampla variedade de ésteres de fosfato e a maior atividade foi observada com PPi, ATP e GTP para pepino e rabanete e PPi, frutose-6-fosfato e GTP para rúcula. Esses resultados demonstraram que a enzima investigada neste estudo é diferente das conhecidas enzimas de plantas que clivam ésteres de fosfato (apirase e pirofosfatases inorgânicas). Desse modo, esta preparação pode ser uma ferramenta útil para futuros estudos toxicológicos e para se estudar inicialmente todas as isoformas das fosfatases ácidas.
Keywords
