Análise fenotípica e genotípica de bactérias heterotróficas e fixadoras de nitrogênio em sedimento na bacia do Rio Cuiabá-MT

Abstract

Os sedimentos apresentam-se como um sistema complexo, que são afetados por parâmetros geológicos, hidrodinâmicos, químicos e biológicos, caracterizado por uma interação entre o ambiente sedimentar de cada região. O presente estudo consistiu em caracterizar a diversidade de bactérias heterotróficas totais e fixadores de nitrogênio em sedimentos do rio Cuiabá utilizando técnicas convencionais de microbiologia e de biologia molecular. As amostras de sedimento foram coletadas com periodicidade bimestral, em quatro pontos sendo estes: Cuiabazinho, Passagem da Conceição, Ribeirão dos Cocais e Barão de Melgaço. As amostras foram processadas através de diluições seriadas (10-2 a 10-7 ) em solução salina 0,85%. Em seguida cultivadas em placa de Petri através da técnica de Spreed Plate, em meio de cultivo Trypic Soy Agar (TSA) para bactérias heterotróficas totais e para bactérias nitrificantes foram utilizados meios seletivos (NFB, JMV e Meio 79) incubadas a 35°C. Posteriormente as estirpes bacterianas foram reisoladas em Agar Nutriente (AN) a fim de obter cultura pura para análise morfotintorial de Gram. Este teste permitiu verificar que dos 202 isolados bacterianos, 59% eram bastonetes positivos, sendo que, a maior quantificação bacteriana obtida foi no meio de cultivo TSA, comparado aos outros meios de cultura. O perfil da comunidade bacteriana apresentou na sua maioria bactérias da família Bacillaceae com 28%, sendo que as mesmas foram utilizadas para a análise molecular por Box-PCR, que apresentou uma riqueza de espécies. Esses resultados indicam a importância de pesquisas sobre diversidade microbiana de sedimentos no Estado de Mato Grosso que utilizam técnicas moleculares.

Keywords

• autodepuração
• biologia molecular
• Box-PCR