EFEITOS IMUNOMODULADORES DO ARTESUNATO EM UM MODELO ANIMAL DE SÍNDROME MIELODISPLÁSICA

Abstract

Introdução: A síndrome mielodisplásica (SMD) é um grupo heterogêneo de doenças da medula óssea que pode progredir para leucemia mieloide aguda. O modelo murino NUP98-HOXD13 apresenta displasia na medula óssea e extensa apoptose de precursores hematopoéticos, levando a citopenias no sangue periférico, e aproximadamente um terço dos camundongos progride para leucemia aguda. Estudos anteriores relataram que a artemisinina (ART), um derivado da Artemisia annua, possui atividade imunomodulatória e antitumoral promissora. No entanto, poucos estudos exploraram seu potencial em modelos in vivo de SMD. Este estudo visou a investigar os efeitos múltiplos da ART no ambiente imune de um modelo animal de SMD, focando em alterações em células progenitoras e na modulação do microambiente imunológico. Métodos: Camundongos transgênicos C57BL/6-Tg(Vav1-NUP98/HOXD13)G2Apla/J (NHD13) foram utilizados como modelo de SMD. Os animais foram tratados com ART (100 mg/kg/i.p.) ou veículo duas vezes por semana durante 4 meses. Amostras de medula óssea, baço e sangue periférico foram coletadas para análise por citometria de fluxo. Foram avaliados parâmetros hematológicos, bioquímicos e imunofenotípicos, além da produção de óxido nítrico (NO) e espécies reativas de oxigênio (ROS). Citocinas e quimiocinas do sobrenadante de medula óssea foram avaliadas por análise multiplexada por meio de beads magnéticas. Análises de Western Blot foram realizadas nas proteínas totais das células da medula óssea para avaliar possíveis vias relacionadas à atividade imunomoduladora da ART. Resultados: O tratamento com ART aumentou significativamente a produção de NO por células-tronco hematopoéticas de curto prazo (ST-HSC) e a produção de ROS por monócitos intermediários. Observou-se uma redução expressiva de neutrófilos imunossupressores e um aumento notável de células NK na medula óssea e no baço. Além disso, a hematopoiese extramedular no baço foi significativamente reduzida após o tratamento com ART. Os níveis de TNF-α no sobrenadante da medula óssea de camundongos NHD13 também foram reduzidos. Verificou-se maior expressão da proteína p-p38 em camundongos NHD13 tratados com ART. Não foram observadas alterações significativas nas contagens de hemoglobina, leucócitos e plaquetas durante o tratamento, nem toxicidade crônica. Discussão: Os resultados sugerem que o ART modula o ambiente imunológico na medula óssea de camundongos NHD13, reduzindo células imunossupressoras e aumentando células NK. A diminuição da hematopoiese extramedular no baço indica uma potencial normalização da hematopoiese. A redução dos níveis de TNF-α corrobora o efeito anti-inflamatório do ART. A ativação da via p38 MAPK pode estar correlacionada com a modulação do ambiente oxidativo, a redução de citocinas inflamatórias e a normalização da hematopoiese extramedular observados. Estes achados são consistentes com a literatura existente que sugere atividades antitumorais e imunomoduladoras do ART. Conclusão: Este estudo demonstra pela primeira vez os efeitos in vivo do ART em um modelo murino de SMD, evidenciando uma modulação imunológica significativa na medula óssea com redução de células imunossupressoras e aumento de células NK, além da diminuição da hematopoiese extramedular. Esses resultados reforçam o potencial terapêutico do ART para SMD.