Revista Brasileira de Hematologia e Hemoterapia (Jan 2012)
Molecular analysis of the GYPB gene to infer S, s, and U phenotypes in an admixed population of Minas Gerais, Brazil Análise molecular do gene GYPB para inferência dos fenótipos S, s e U em uma população miscigenada de Minas Gerais - Brasil
Abstract
OBJECTIVE: To implement genotyping for S, s and U antigens of the MNS blood group system at the Fundação Hemominas and to evaluate the occurrence of GYPB gene polymorphisms associated with the U- and U+var phenotypes and deletion of the GYPB gene for the first time in an admixed population of Minas Gerais, Brazil. The S, s and U antigens can cause transfusion reactions and perinatal hemolytic disease. Genotyping is a useful tool in immunohematology, especially when phenotyping cannot be performed. METHODS: Ninety-six samples from blood donors and patients with sickle cell disease previously phenotyped for the S, s and U antigens were selected. Allele-specific primer polymerase chain reaction (ASP-PCR) and polymerase chain reaction -restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) assays were employed to identify the GYPB*S and GYPB*s alleles and the GYPB(P2) and GYPB(NY) variants, as well as deletion of the GYPB gene. RESULTS: The results of allele-specific genotyping (GYPB*S and GYPB*s) were totally in agreement with the phenotyping of S+ (n = 56), s+ (n = 60) and s- (n = 35) samples. However, the GYPB*S allele, in association with the GYPB(P2) variant, was detected in 17.5% of the S- samples (n = 40), which shows the importance of assessing this variant in the Brazilian population. Of the S-s- samples (n = 10), 60% had the deletion of the GYPB gene and 40% were homozygous or hemizygous for the GYPB(P2) variant. CONCLUSION: Genotyping was an effective strategy to infer the S, s, and U phenotypes in the admixed population from Minas Gerais (Brazil) and may contribute to transfusion safety.OBJETIVO: Este estudo teve como objetivos: 1) implementar a genotipagem para os antígenos S, s e U do sistema de grupo sanguíneo MNS na Fundação Hemominas e 2) avaliar pela primeira vez em uma população miscigenada de Minas Gerais, Brasil a ocorrência de polimorfismos do gene GYPB relacionados aos fenótipos U- e U+var, assim como a deleção de GYPB. Os antígenos S, s e U podem ocasionar reações transfusionais e doença hemolítica perinatal. A genotipagem é uma ferramenta útil na imuno-hematologia, principalmente quando a fenotipagem não pode ser realizada. MÉTODOS: 96 amostras de doadores de sangue e pacientes com doença falciforme previamente fenotipadas para os antígenos S, s e U foram selecionadas. As técnicas AS/PCR e ensaio combinado AS/PCR - RFLP foram empregadas para identificar os alelos GYPB*S, GYPB*s e as variantes GYPB(P2) e GYPB(NY), bem como a deleção do gene GYPB. RESULTADOS: Os resultados da genotipagem alelo-específica GYPB*S e GYPB*s foram 100% concordantes em relação aos fenótipo S+ (n = 56), s+ (n = 60) e s- (n = 35). Entretanto, o alelo GYPB*S, em associação com a variante GYBP(P2), foi detectado em 17,5% das amostras S- (n = 40), o que revela a importância da avaliação desta variante em nossa população. Entre as amostras S-s- avaliadas (n = 10), 60% apresentaram deleção do gene GYPB, e 40% apresentaram GYPB (P2) em homo ou hemizigose. CONCLUSÃO: A genotipagem é uma estratégia eficaz na inferência dos fenótipos S, s e U na população miscigenada de Minas Gerais, podendo contribuir para a segurança transfusional.
Keywords
