Archives of Razi Institute (Dec 2015)
تشخیص مولکولی سرووارهای بیماری زای لپتوسپیرا با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بر اساس ژن lipL21
Abstract
لپتوسپیروزیس یک بیماری زئونوز با انتشار جهانی است که توسط باکتری لپتوسپیرا اینتروگانس ایجاد می شود. تشخیص دقیق آن برای تمایز لپتوسپیروزیس از دیگر عفونت های تب زا و شایع در محل های مشابه و جهت درمان مناسب حائز اهمیت است. بنابراین یک آزمون تشخیصی مولکولی با حساسیت بالا مانند روش واکنش زنجیره ای پلیمراز ضروری است. ژن های کد کننده ی پروتئین های غشای خارجی لپتوسپیرا کاندیدای بالقوه ای برای تشخیص و تجزیه و تحلیل این بیماری هستند. در این مطالعه ژن lipL21 برای تشخیص و تمایز لپتوسپیراهای بیماریزا از ساپروفیت در آزمایش روش واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد استفاده قرار گرفته است. ژن lipL21 لپتوسپیرا تنها در گونه های پاتوژن بیان می شود. باکتری ها در محیط کشت اختصاصی EMJH همراه با سرم خرگوش کشت داده شدند و استخراج DNA ژنومیک با روش فنل کلروفرم ایزوامیل الکل استاندارد انجام شد. پرایمرهای اختصاصی جهت تکثیر ژن lipL21 طراحی گردید. ژن lipL21 در لپتوسپیراهای بیماریزا مشاهده شد اما در لپتوسپراهای ساپروفیت دیده نشد. ویژگی و حساسیت روش واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد بررسی قرار گرفت. روش واکنش زنجیره ای پلیمراز با ویژگی و حساسیت بالا می تواند یک روش سریع برای تشخیص لپتوسپیروزیس حاد باشد و یک کنترل مثبت برای بهینه سازی این روش تشخیصی طراحی گردید. نتایج نشان داد که تشخیص مولکولی لپتوسپیراهای پاتوژن بر اساس ژن lipL21 را می توان برای تشخیص آزمایشگاهی لپتوسپیروز مورد استفاده قرارداد.
Keywords
