ATIVIDADE CITOTÓXICA IN VITRO DO ÁCIDO COPÁLICO EM CÉLULAS ORIUNDAS DE LEUCEMIA

Abstract

Objetivos: Avaliar o potencial citotóxico do composto ácido copálico (C20H3202) isolado da oleorresina de Copaifera spp em linhagens celulares leucêmicas transformadas (K-562 e HL-60). Material e métodos: Trata-se de um estudo experimental, do tipo pré-clínico de fase I. A atividade citotóxica foi avaliada através do ensaio de Metiltiazoletrazolium (MTT). As células foram cultivadas em placas de cultura de 96 poços contendo suplementado e tratadas com diferentes concentrações do composto em triplicata (200, 100; 50; 25; 12,5 e 6 μg/mL). Para o controle positivo, foi utilizado os meios RPMI ou DMEM estéril e como controle negativo o DMSO 100%. As placas foram incubadas por 24 e 48 hrs a 37°C. Após ncubação, foi realizado a remoção do meio e adicionado o MTT com 100 μL de meio RPMI sem vermelho de fenol e incubado por 4 horas. Após isso, o MTT foi removido e 70 μL de DMSO 100% foram adicionados e incubados por 20 minutos. A viabilidade celular foi verificada por meio das absorbâncias medidas via espectrofotometria e a viabilidade celular relativa das células foi estimada usando a seguinte equação: (expressa como absorbância óptica A570 da amostra tratada)/(A570 da amostra não tratada) × 100. Resultados: O composto demonstrou citotoxicidade elevada contra linhagens leucemicas (K-562 e HL-60) tratadas com diferentes concentrações entre 6 - 200 μg/mL durante o período de 24 e 48h. Na linhagem K-562 tratadas com AC, demonstrou-se uma dimunuição drástica na formação de colônias com o valor de IC50 34 μM e apresentando atividade citotóxica significativa nas concentrações de 100 e 200 μg/mL (p < 0,001) em comparação com o controle (células não tratadas) na cinética de 24 e 48h. Da mesma forma, as células HL-60 tratadas com 100 e 200 μg/mL reduziram a viabilidade celular apresentando um IC50 32 μM (p < 0,001) em comparação com o controle negativo. Discussão: O ácido copálico (AC) presente na resina de copaíba sp, é um diterpeno natural, com um promissor potencial farmacêutico como agente antineoplásico. Estudos demonstram que após 48h de incubação o AC se mostrou citotóxico, apresentando uma redução na viabilidade das células tratadas, é destacado o seu efeito imunomodulador in vitro, capaz de inibir a proliferação celular e diminuir a produção de citocinas. De forma semelhante com os resultados encontrados em nosso estudo. No qual, também foi possível observar uma citotoxicidade aumentada quando comparada com o controle. Conclusão: Portanto, podemos concluir que o ácido copálico demonstrou um potencial citotóxico capaz de inibir a proliferação em linhagens celulares leucêmicas transformadas (K-562 e HL-60). No entanto, são necessários ensaios complementares in vivo, que busquem melhor elucidar eficácia desse composto e seus efeitos imunomoduladores.