Cukurova Medical Journal (Sep 2021)
Sisplatin ve insan mezenkimal kök hücrelerden izole edilen mitokondri naklinin DU-145 hücre proliferasyonuna etkisi
Abstract
Amaç: Bu çalışmada antineoplastik bir ilaç olan sisplatin ve insan mezenkimal kök hücrelerinden (İMKH) izole edilen mitokondriler, insan prostat kanser hücrelerine (DU-145) uygulanarak, proliferasyon ve sitotoksisitenin değerlendirilmesi hedeflenmiştir. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda, İMKH ve DU-145 hücre hatları kullanıldı. İMKH’ ler ~20x106 hücre olacak şekilde çoğaltılarak kitte belirtilen protokollere göre mitokondriler izole edildi. İzole mitokondrilerin protein miktarı, bikinkoninik asit yöntemiyle (BCA) ölçüldü. DU-145 hücreleri, her kuyuda 10x103 hücre olacak şekilde 96’ lık plate’e ekildi. Sisplatin’ in 6 µM ve 14 µM dozları 24 saat uygulandı. İnkübasyon sonunda hücre medyumları değiştirildi ve izole mitokondriler (10x, 100x) eklenerek tekrar 24 saat inkübe edildi. Hücre çoğalması ve canlılığı tetrazolyum tuzu (MTT) yöntemiyle, 570nm-630nm absorbans değerleri plate okuyucu da ölçülerek farkları alındı ve hücre çoğalma yüzdeleri hesaplandı. Bulgular: DU-145 hücrelerine 6 µM sisplatin uygulaması kontrol grubuna göre proliferasyonu %35 oranında azaltırken, 14 µM sisplatin ise hücre proliferasyonunu %68 azalttı. Cis-6 µM grubuyla karşılaştırıldığında, Cis-6 µM+Mito-10x grubunda proliferasyonda anlamlı fark görülmezken, Cis-6 µM+Mito-100x grubunda anlamlı azalma görüldü. Sonuç: Prostat kanseri hücrelerine sisplatin ile birlikte mitokondri transplantasyonu yapıldığında proliferasyonu daha da azalmaktadır. Ayrıca, mitokondri transplantasyonunun intrasellüler çeşitli proliferatif, apopitotik sinyal yolaklarını etkileyerek ve mikroçevreyi düzenleyerek kanserli hücrelerin çoğalmasını azaltabilir.
Keywords
