Acta Biológica Colombiana (Jan 2006)
Cultivo en monocapa de células perineurales de nervio ciático de Ratón
Abstract
El cultivo de células perineurales (CP) y su estudio in vitro es muy pobremente reportado en la literatura. El presente trabajo describe la obtención de CP en monocapa a partir de nervio ciático de ratón. Fueron probadas diferentes técnicas para obtener un cultivo de CP puro. La microdisección del nervio en endoneuro, perineuro y epineuro fue la mejor técnica para evitar otros tipos celulares. Adicionalmente, la refrigeración a 4º C por 24 horas permitió purificar al 99% los cultivos de CP. Las células de Schwann, fibroblastos endoneurales y células perineurales fueron diferenciadas por microscopia de luz invertida. Las células provenientes del perineuro presentaron una morfología aplanada, de gran tamaño, formando capas estratificadas. Además, las células migraron luego del día diez de cultivo y alcanzaban una densidad alta luego de cinco días de haber migrado. La formación de lamelas estratificadas en cultivo fue demostrada con cortes histológicos, mostrando similitud con el tejido in vivo. Establecimos un protocolo para el cultivo de CP que servirá de modelo para posteriores estudios sobre este tejido y sus futuras aplicaciones.
