ایجادپلاک توسط سویه لاسوتا ویروس بیماری نیوکاسل سازگاریافته برروی سلولهای فیبروبلاست جنین جوجه

Abstract

برای سازش دادن سویه لاسوتا ویروس بیماری نیوکاسل (NDV) برروی سلولهای فیبروبلاست جنین جوجه 1/. میلی لیتراژ واکسن لاسوتا، ساخت موسسه تحقیقات واکسن وسرم سازی رازی به سلولهای فیبروبلاست جنین جوجه تلقیح و برای پنج باردرفیبروبلاست جنین جوجه بااستفاده ازمحیط MEM پاساژ داده شد. پاساژهای اول تا سوم کور بودند درحالیکه در پاساژ چهارم اثر سیتوپاتیک ویروس برروی سلولها مشاهده گردید. ویروس های پاساژ پنجم در تخم مرغ های عاری ازجرم (SPF) جنین دار تکثیر یافتند و مایع آلانتوئیک حاوی NDV باعیار EID50/ml 108 جمع آوری شدند. برای سنجش ایجاد پلاک توسط مایع آلونتوئیک حاوی ویروس ازدولایه آگار استفاده گردید. لایه اول محیط کشت حاوی تریپسین، DEAE دکستران و سولفات منیزیوم و لایه دوم حاوی همین مواد باضافه نوترال ردب ودکه 72 ساعت پس ازلایه اول ریخته شد. 8 ساعت پس از ریختن لایه دوم آگار با پلاک های ویروس سازش یافته باشکل و اندازه های متفاوت از 1 تا 3 میلی متر قطر ظاهر شدند. پلاک های مجزا در رقت 6ـ10دیده شدند و عیار ویروس PFV/ml 107×3 محاسبه شد. با استفاده از محیط کشت حاوی آکار بدون ترپسین، DEAE ، سولفات منیزیوم و DEAE دکستران درهیچ کدام از رقت های ویروس پلاک مشاهده نگردید.

Keywords

• ویروس نیوکاسل
• امبریو فیبروبلاست جنین جوجه
• پلاک