Archives of Razi Institute (Dec 2015)
تشخیص مولکولی ویروس فلج مزمن زنبور عسل (CBPV) برای اولین بار در ایران
Abstract
در میان ویروس های آلوده کننده زنبور عسل، ویروس فلجی مزمن (CBPV) به عنوان عامل بوجود آورنده زیان های قابل توجه در کلنی های زنبور عسل شناخته شده است. ویروس فلجی مزمن یک RNA ویروس تک رشته ای، پلی مورف و طبقه بندی نشده می باشد. با استفاده از تکنیک RT-PCR، عفونت با این ویروس در زنبور عسل را می توان به شیوه ای سریع و دقیق شناسایی کرد. در این مطالعه از زنبورهای بالغ کلنی های مبتلا، با علائم کاهش جمعیت، ریزش ناگهانی، فلجی، و آلودگی با وآروآ یا کلنی هایی که دارای سابقه چنین علائمی بوده اند، استفاده شده است. نمونه ها از زنبورستانهای واقع در 23 استان ایران در فاصله ماه های جولای تا سپتامبر 2011 و 2012 جمع آوری گردید. مجموعاً از 160 زنبورداری نمونه جمع آوری و با رعایت زنجیره سرد برای غربالگری ویروس به آزمایشگاه مولکولار بایولوژی بخش زنبور عسل موسسه رازی انتقال یافت. از هر زنبورداری 500-100 زنبور کارگر بالغ نمونه برداری شد. استخراج RNA و RT-PCR با کیت های QIAGEN انجام گردید. پرایمرها یک قطعه bp315 را تکثیر می دادند. محصولات روش واکنش زنجیره ای پلیمراز روی ژل آگارز 2/1 ٪ (رنگ آمیزی شده با اتیدیوم بروماید) الکتروفورز شدند. به دنبال واکنش RT-PCR با پرایمرهای اختصاصی، از RNA های استخراج شده، 12 نمونه (5/7٪) با CBPV مثبت تشخیص داده شدند. در این مطالعه برای اولین بار ویروس فلجی مزمن زنبور عسل (CBPV) با روش مولکولی از تعدادی از زنبورستانهای مناطق مختلف ایران جداسازی و شناسایی گردید. لازم است مطالعات بیشتری در زمینه میزان پراکنش ویروس در زنبورستانهای مناطق مختلف ایران بر اساس شرایط جغرافیایی و آب و هوایی، نحوه پرورش و مدیریت بهداشت کلنی ها صورت پذیرد.
Keywords
