Comparación de técnicas in vitro para detectar resistencia de Plasmodium falciparum a medicamentos

Abstract

Debido a que la resistencia de Plasmodium falciparuma medicamentos se percibe como uno de los problemas que más agrava la situación de la malaria en Colombia, existe la necesidad de implementar procedimientos que permitan hacer una búsqueda amplia y confiable de resistencia para establecer la prevalencia y la variación del fenómeno al nivel epidemiológico. En este trabajo se estableció la resistencia de varias cepas de referencia y algunos aislamientos de campo de P falciparum a medicamentos como cloroquina, amodiaquina, mefloquina, quinina, halofantrina, pirimetamina y sulfadoxina. La búsqueda de resistencia se hizo a través de cuatro estrategias experimentales: una prueba modificada en nuestro laboratorio, eficaz para detectar resistencia a varios medicamentos de manera simultánea (prueba radiométrica); ensayos de PCR para detectar el polimorfismo de la región 3' del gen pfmdrl (gen de resistencia múltiple a medicamentos de P falciparum) asociado con resistencia a cloroquina; ensayos de PCR para detectar mutaciones en la dihidrofolato reductasa (DHFR) y en la dihidropteroato sintetasa (DHPS), relacionadas con resistencia a pirimetamina y sulfadoxina respectivamente, y una técnica modificada por nosotros para establecer resistencia a cloroquina (Rapid-test). Se estableció que el ensayo más adecuado para hacer una búsqueda de resistencia in vitro a medicamentos es el PCR. Infortunadamente, aun se desconocen las bases moleculares de la resistencia a varios de los antimaláricos empleados y esto hace que la prueba radiométrica sea la mejor alternativa para detectar, a escala epidemiológica, la resistencia in vitro a cloroquina, amodiaquina, mefloquina, quinina y halofantrina.

Keywords

• antimalarials
• resistance
• plasmodium falciparum
• multidrug resistance gene
• dihydrofolate reductase
• dihydropteroate synthetase
• rapid-test
• micro-test