1-苯基-2-硫脲抑制flk1型斑马鱼黑色素生成的最佳浓度

Abstract

摘 要:【目的】探讨1-苯基-2-硫脲(PTU)对抑制血管荧光转基因型flk1斑马鱼黑色素生成的能力,探索在不影响斑马鱼正常生长发育条件下,能保持斑马鱼透明性的最佳浓度?【方法】 用0.0125~1.0 mmol/L浓度区间的PTU与24 hpf (hours post fertilization)斑马鱼胚胎共同孵育,观测PTU抑制黑色素生成情况,通过观察斑马鱼形态学变化?记录80 hpf后的孵化率和死亡率?测量心率和静脉窦-动脉球间距等生理学变化,评价PTU处理对斑马鱼生长发育的影响? 【结果】 随着PTU浓度的增加, 黑色素抑制能力增强,毒性逐渐增加,表现为斑马鱼死亡率增加?孵化率下降?心率下降?静脉窦-动脉球之间的距离增大?浓度为0.0125-0.025 mmol /L 的PTU对斑马鱼活性基本无影响,浓度≥0.05 mmol/L的PTU能完全抑制黑色素的生成?当PTU浓度为 0.025 mmol/L时,生成的黑色素不影响斑马鱼血管观察, 当PTU浓度为0.05 mmol/L时,斑马鱼的心率和静脉窦-动脉球间距基本不受影响?【结论】 对于72 hpf 前的flk1型斑马鱼实验,应根据具体实验要求,在浓度≤0.05 mmol/L范围内选择适当的PTU浓度,使黑色素的生成既不影响实验观察和信号检测,同时对生长发育的影响减至最小?

Keywords

• 斑马鱼;1-苯基-2-硫脲;黑色素抑制;毒性