野生动物学报 (Nov 2024)
羽翈中DNA和糖皮质激素共提取技术的研究
Abstract
羽毛是鸟类研究、监测和管理中常用的非损伤性材料，可从中提取DNA和激素进行遗传和生理分析。然而，作为高度角化的组织，羽翈中的DNA和激素含量极低，提取较为困难。本研究开发一种能够从羽翈中同时提取总DNA和糖皮质激素的方法，命名为DH-CoEx。以丹顶鹤（Grus japonensis）、绿孔雀（Pavo muticus）为代表的大型鸟类廓羽、尾上覆羽和以栗鹀（Emberiza rutila）、小鹀（E.pusilla）为代表的小型鸟类飞羽、绒羽进行测试和评估。结果显示：DH-CoEx能有效从完全角化的羽翈中同时提取出总DNA及糖皮质激素（皮质醇）；从5 mg样本中提取的线粒体DNA（mtDNA）拷贝数达到104量级，可支持长达1 350 bp的片段扩增；所提取的核DNA（nuDNA）质量足以进行长达200 bp的微卫星等位基因分型，成功率为98.11% ~ 99.60%；提取的皮质醇含量达到了传统单一提取激素方法的水平，足以进行相关生理学分析。以上结果说明，DH-CoEx是一种简易、高效和适用性广泛的方法，实现了角化材料总DNA和糖皮质激素的共提取，可以支持mtDNA和微卫星等分子标记的分析和应激激素的分析，极大地提高了羽毛的利用率，具有广泛的应用潜力。
