Archives of Razi Institute (May 2009)

کلونینگ و بیان ژن ESAT -6 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در سیستم پروکاریوتی

  • اسماعیل اصلی,
  • م. تقی زاده,
  • علیرضا رضایی مکرم,
  • س.م. ابراهیمی,
  • ا. زواران حسینی,
  • م. تبیانیان

DOI
https://doi.org/10.22092/ari.2009.103800
Journal volume & issue
Vol. 64, no. 1
pp. 1 – 7

Abstract

Read online

هدف از این مطالعه جداسازی و کلون کردن وبیان ژن ESAT-6 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس به عنوان یکی از آنتی ژن‌های مهم این میکروارگانیسم می‌باشد. ابتدا ژن مربوط به این ملکول با استفاده از پرایمرهای طراحی شده، از روی ژنوم باکتری تکثیر شد و سپس در درون وکتور بیانی PQE30 کلون گردید. در مرحله بعد پلاسمید نوترکیب ایجاد شده به درون میزبان E.coli M15 ترانسفورم گردید و با بهینه نمودن سیستم بیانی ، با موفقیت بیان شد. پروتئین بیان شده با استفاده از SDS-PAGE ردیابی شد و با استفاده از آنتی بادی اختصاصی علیه در روش وسترن بلات تایید گردید. پروتئین نوترکیب بدست امده را می‌توان علاوه بر مطالعات تشخیصی، در امورمربوط به طراحی واکسن های ساب یونیت و یا DNA vaccine بر علیه توبرکلوزیس استفاده نمود.

Keywords