Semina: Ciências Biológicas e da Saúde (Oct 2007)
Screening and confirmatory assays for detection of ESBLs (extendedspectrum ß-lactamases) production by Klebsiella pneumoniae isolates <br> Métodos de triagem e de confirmação para detecção de BLEAs (beta lactamases de espectro ampliados) em isolados de Klebsiella pneumoniae
Abstract
ESBLs (extended-spectrum ß-lactamases) are enzymes produced by Enterobacteriaceae, especially Klebsiella pneumoniae, which mediate resistance to extended-spectrum ß-lactams and aztreonam. Considering the importance of detecting ESBLs producing strains, in this study, usual screening and confirmatory assays were compared. One hundred and seven strains of K. pneumoniae, isolated from patients with urinary tract infection, were screened for ESBLs production according to NCCLS 2005 guidelines, using broth microdilution in the Microscan Walkaway (Dade Behering) and Kirby-Bauer disk diffusion (KBD) test. Fifty-five strains selected as possible ESBL producers (51,4%), were submitted to confirmatory assays: E-test, double disk (DD) approximation and clavulanic acid (CA) association. Production of ESBLs was detected by the five methods used in 38 (69%) strains and 10 (18,2%) were negative only in DD. Seven strains (12,7%) did not present suggestive breakpoints in the Microscan Walkaway and were negative in the DD test, whereas the KBD values for the same strains obtained were indicative of ESBLs production. These results suggest that the combination of KBD breakpoints determination and CA association can be used as an efficient, alternative and less expensive system than the E-test. BLEAs (ß-lactamases de espectro estendido) são enzimas produzidas por várias espécies de Enterobacteriaceae, principalmente Klebsiella pneumoniae, as quais conferem resistência aos ßlactâmicos de espectro ampliado e aztreonam. Considerando a importância da detecção de BLEAs, neste estudo foram comparados métodos de triagem e de confirmação. As 107 amostras de K. pneumoniae, isoladas de pacientes com infecção urinária foram triadas quanto à produção de BLEAs, segundo normas do NCCLS 2005, utilizando microdiluição em caldo no Microscan Walkaway e teste de disco difusão de Kirby-Bauer (KBD). As 55 cepas selecionadas foram submetidas a ensaios de confirmação como possíveis produtoras de BLEAs (51,4%): E-test, aproximação com discos duplos (DD) e associação com ácido clavulânico (CA). A produção de BLEAs foi detectada pelos cinco métodos em 38 (69%) amostras e 10 amostras (18,2%) foram negativas para o teste DD. Sete amostras (12,7%) não apresentaram valores sugestivos no método automatizado e também foram negativos no teste de DD, mas os valores dos halos no teste de KBD foram indicativos da produção de BLEAs. Estes resultados sugerem que o uso combinado do método KBD e associação com CA podem ser utilizados como um sistema alternativo eficiente e menos dispendioso que o E-test.
