Acta Scientiarum: Technology (Oct 2010)
Uso de carvão ativado e resina de troca iônica para limpeza e concentração de enzimas em extratos de madeira biodegradada = Use of activated charcoal and ion-exchange resin to cleaN up and concentrate enzymes in extracts from biodegraded wood
Abstract
Ceriporiopsis subvermispora foi utilizado para a biodegradação de cavacos de Eucalyptus grandis na presença ou ausência de cossubstratos (glicose e milhocina) durante 7, 14 e 28 dias. Os cavacos obtidos em cada um desses períodos foram extraídos com tampãoacetato de sódio 50 mM (pH 5,5) adicionado de 0,01% de Tween 60. A atividade de manganês peroxidases (MnPs) nos extratos foi marcante ao longo de todo o período de biodegradação, tanto na ausência (430, 765 e 896 UI kg-1, respectivamente) quanto na presença de cossubstratos (1.013, 2.066 e 2.323 UI kg-1, respectivamente). Os extratos apresentaram elevadas relações entre absorbância a 280 e a 405 nm, indicando forte abundância de compostos aromáticos derivados da lignina em relação à heme-peroxidases. A adsorção em carvão ativado se mostrou uma estratégia adequada para reduzir a absorbância a280 nm em todos os extratos. Além disso, permitiu maximizar a capacidade de um leito de resina trocadora de ânions (DEAE Sepharose), utilizado para concentrar as MnPs presentes nos referidos extratos. Concluiu-se que o uso de carvão ativado seguido de adsorção em DEAE Sepharose é uma estratégia que pode ser utilizada para concentrar MnPs em extratos obtidos durante a biodegradação de E. grandis por C. subvermispora.Ceriporiopsis subvermispora was used for the biodegradation of Eucalyptus grandis chips in the presence or absence of cosubstrates(glucose and corn steep liquor) during 7, 14 and 28 days. Afterwards, the biodegraded chips were extracted with 50 mM sodium acetate buffer (pH 5.5) supplemented with 0.01% Tween 60. High activities of manganese peroxidases (MnPs) were observed in all the extracts, both in the absence (430, 765 and 896 UI kg-1, respectively) and in the presence of co-substrates (1,013; 2,066 and 2,323 UI kg-1, respectively). The extracts presented a high ratio between absorbances at 280 and 405 nm, indicating a strong abundance of aromatic compounds derived from lignin over hemeperoxidases. Adsorption into activated charcoal showed to be an adequate strategy to reduce the absorbance at 280 nm in all the extracts. Moreover, it allowed to maximize the capacity of an anion exchange resin bed (DEAE-Sepharose) used to concentrate the MnPs present in the extracts. It was concluded that the use of activated charcoal followed by adsorption into DEAE Sepharose is a strategy that can be used to concentrate MnPs in extracts obtained during the biodegradation of E. grandis by C. subvermispora.
