Revista Colombiana de Biotecnología (Jul 2002)
Técnica de inmunoimpresión en membranas de nitrocelulosa: una detección rápida para estimar la incidencia de los virus PVX, PVY, PVS y PLRV que infectan a la papa (Solanum spp.)
Abstract
La técnica serológica de ELISA, se ha utilizado desde los años setentas como técnica cuantitativa para la detección de diversos grupos de virus que infectan a las plantas. Más recientemente se ha implementando la técnica cualitativa de inmunoimpresión (IMI) en membrana de nitrocelulosa, en la detección de diferentes grupos virales. En el presente trabajo se adaptó la técnica de IMI para la detección de los virus PVX, PVY, PVS y PLRV que atacan los cultivos de diferentes especies y variedades de papa (Solanum sp.) como yema de huevo, capiro, morita, pastusa, monserrate, tuquereña, ICA Puracé, ICA Nariño. Estos cuatro virus pueden causar pérdidas entre el 30% y 60% en la producción, ya sea solos o actuando sinergísticamente, por lo cual pueden reducir sensiblemente los beneficios económicos de un país que como Colombia se caracteriza por ser un gran productor de papa, con más de 2.8 millones de toneladas al año. La técnica IMI se comparó con la técnica ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) realizada sobre las mismas muestras, lo que permitió confirmar la sensibilidad de la prueba para la detección de los virus. Sobre un total de 800.muestras analizadas por IMI procedentes de diferentes veredas del departamento de Nariño, se encontró una incidencia del 72% para PVY, 38.7%, para PVX, 85.6% para PVS y 91.1% para PLRV; estimaciones que fueron similares o superiores a las obtenidas por la técnica de ELISA. Los resultados son novedosos para Colombia tanto por la implementación de la fácil y sensible técnica IMI para la detección de estos cuatro grupos virales que infectan a la papa como por la estimación de su incidencia en Nariño, uno de los departamentos productores de papa más importantes para el país. La detección oportuna y ágil de los virus es útil para dar una respuesta efectiva para la erradicación de material contaminado, tanto en material de campo como si es necesario, proveniente de cultivo in vitro. Los resultados de este trabajo permiten sugerir que la implementación de la técnica IMI, puede ser muy útil para los programas de certificación de semillas de papa con amplios beneficios puesto que se mantiene la sensibilidad y la especificidad, se reducen costos y es además participativa pudiendo involucrar a técnicos y agricultores.
