Purification and biochemical characterization of an extracellular lipase produced by a new strain of Rhizopus sp. Purificação e caracterização bioquímica de lipase extracelular produzida por uma nova linhagem de Rhizopus sp.

Abstract

The present study had as a goal to purify and characterize the lipolytic fraction secreted by a strain of Rhizopus sp. Only 3 steps of purification were necessary to achieve SDS-PAGE homogeneity. One band with 37.5 KDa molecular mass and with 1446 U/mg specific activity was obtained. The purified fraction presented 2 lipase isoforms; both showed optimum activity at 50ºC, and were stable between 6.5 and 7.5 pH values and at temperatures below 50ºC and also kept their activity in hexane. The lipase was inactivated by Hg+2 and by n-bromosuccinimide and activated by Na+.O presente trabalho teve por objetivo purificar e caracterizar a fração lipolítica secretada por uma linhagem de Rhizopus sp. Apenas 3 etapas de purificação foram necessárias para alcançar homogeneidade em eletroforese de proteína desnaturada. Uma única banda com massa molecular de 37,5 KDa e atividade específica de 1446U/mg foi obtida. A fração purificada apresentou 2 isoformas de lipase, ambas com temperatura ótima de atividade igual a 50ºC, mantiveram-se estáveis entre valores de pH entre 6,5 e 7,5 e a temperaturas inferiores a 50ºC e mantiveram sua atividade na presença de hexano. A fração lipolítica foi inativada por Hg+ e por n-bromosuccinimida e ativada por Na+.

Keywords

• Lipase
• Rhizopus sp.
• purificação
• caracterização bioquímica
• Lipase
• Rhizopus sp.
• purification
• biochemical characterization