Revista de Biología Tropical (Jun 2003)
Veneno de Latrodectus mactans de Chile (Araneae, Theridiidae): su efecto sobre músculo liso
Abstract
El veneno de arañas del género Latrodectus induce contracción de músculo liso de mamíferos, postulándose como posible mecanismo la liberación de mediadores adrenérgicos y colinérgicos. El veneno de Latrodectus mactans de Chile contiene neurotoxinas que inducen actividad contráctil en músculo liso en forma parcialmente independiente de actividades adrenérgicas y colinérgicas, lo que deja abiertas interrogantes sobre el mecanismo de acción del veneno. La respuesta tónica en músculo liso depende de la movilidad de los iones sodio (Na+ )y calcio (Ca2+) y, más es-pecíficamente, de la concentración de Ca2+ citoplasmático. Una de las vías de ingreso del calcio al músculo liso, además de los canales tipo L de Ca2+ , es el intercambiador Na+/Ca2+ . En el presente trabajo se estudia la posible participación de este intercambiador en la respuesta tónica inducida por el veneno sobre músculo liso del conducto deferente de rata, en un modelo de órgano aislado. Utilizando bloqueadores de canales de Na+ (amiloride) y Ca2+ (nifedipina) y una solución estimuladora del intercambiador (Tyrode pobre en sodio), se realizaron registros de tensión isométrica inducida por el veneno. Simultáneamente al uso de nifedipina, se registraron las variaciones de la [Ca2+] citoplasmática mediante microfluorimetría. Se observó que la inhibición de la contracción en presencia de amiloride depende de su concentración, mostrando una participación de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje en la contracción. En presencia de nifedipina, la contracción inducida por el veneno sólo fue parcialmente inhibida, y la microfluorimetría mostró un aumento de la concentración de Ca2+ citoplasmático en presencia del bloqueador, lo que indica una participación de otros mecanismos para el ingreso de Ca2+ a la célula. Por último, al disminuir la concentración de Na+ extracelular se estimuló la contracción tónica en un 30.7%, atribuible, al menos en parte, al intercambiador Na+/Ca2+ . Estos resultados permiten proponer que el intercambiador Na+/Ca2+ se encuentra activo durante la contracción tónica inducida por el veneno de L. mactans de Chile y podría ser uno de los responsables del desarrollo de tensión.The venoms of Latrodectus sp. have been reported to induce contraction probably mediated by adrenergic and cholinergic transmitters. We have demonstrated that the venom of Chilean Latrodectus mactans contains neurotoxins that induce a contraction partially independent of transmitters release. Transmembrane mobility of Na+ and Ca2+ ions and more specifically, the increase of cytoplasmic calcium concentration are responsible for tonic contraction in smooth muscle. Calcium may enter the cell by several ways, such as the voltage-dependent Ca2+ L-type channels and the Na+ /Ca2+ exchanger. This study aimed to examine the participation of this exchanger in the tonic contraction of smooth muscle in vas deferent of rat induced by the venom of the Chilean spider L. mactans. Blockers of Na+ channels (amiloride) and Ca2+ L-type channels (nifedipine), and a stimulator of the exchanger (modified Tyrode, Na+ 80 mM) were used. Simultaneously, variations of the cytoplasmic concentration of Ca2+ were registered by microfluorimetry (Fura-2 indicator) in the presence of nifedipine. In presence of amiloride, dose-dependent inhibition of venom-induced contraction was observed, suggesting the participation of voltage-dependent Ca2+ L-type channels. The contraction was only partially inhibited by nifedipine and the Ca2+ cytoplasmic concentration increased, as assessed by the microfluorimetric registration. Finally, the venom-induced contraction increased in the presence of modified Tyrode, probably due to the action of the Na+ /Ca2+ exchanger. Taken together, our results support the idea that the Na+ /Ca2+ exchanger is active and may be, at least in part, responsible for the contraction induced by the venom of Chilean L. mactans.
