Acta Scientiarum: Biological Sciences (Oct 2010)
Evaluation of a simplified key for the identification of coagulasepositive Staphylococcus isolated from bovine mastitis = Avaliação de uma chave de identificação simplificada para Staphylococcus coagulase-positivos isolados de mastite bovina
Abstract
Evaluation of a simplified key for the identification of coagulase-positive Staphylococcus isolated from bovine mastitis. Three hundred fourty four strains of coagulasepositive Staphylococcus (CPS), isolated from mastitis cases, underwent phenotypic and genotypictests to evaluate the efficiency of a simplified key, based on phenotypic tests for the discrimination of these microorganisms. The tests consisted of amplification of the femA gene and hemolysis in blood agar, production of acetoin and fermentation of maltose, mannitol and trehalose. Strains that showed negative results in the amplification test of the femA gene or that were not identified as Staphylococcus aureus (S. aureus) by phenotypic tests were tested with the APISTAPH kit (Biomériux-France), for precise identification of species. Phenotypic tests revealed 338 strains (98.25%) as S. aureus, three strains (0.86%) as Staphylococcus hyicus, and threemicroorganisms (0.86%) as Staphylococcus intermedius. PCR demonstrated that 338 (98.25%) strains belonged to the S. aureus species, confirming the results for 336 strains from 338 identified, through a simplified phenotypic key. A high rate of correlation (98.83%) was verifeid between the results of genotypic and phenotypic tests for the identification of S. aureus, demonstrating the applicability of the proposed key, for the discrimination of this microorganism in CPS isolated from bovine mastitis.Visando testar a eficiência de uma chave simplificada baseada em testes fenotípicos para a discriminação de Staphylocococcus coagulasepositivos (SCP) isolados de infecções intramamárias de bovinos, 344 amostras destes microrganismos foram submetidas a testes fenotípicos e genotípicos. Estes consistiram na amplificação do gene femA, na observação de hemólise em ágar sangue, produção de acetoína efermentação de maltose, manitol e trealose. Amostras que apresentaram resultado negativo na amplificação do gene femA ou que foram identificadas com não Staphylococcus aureus (S. aureus) por meio dos testes fenotípicos foram submetidas ao kit APISTAPH (Biomériux-França) para identificação mais precisa. Os testes fenotípicos utilizados na chave simplificada permitiram identificar 338 amostras (98,25%) como S. aureus, três amostras (0,86%) como Staphylococcus hyicus e três (0,86%) como Staphylococcus intermedius. Por meio da reação em cadeia da polimerase (PCR) 338 (98,25%) amostras foram identificadas como S. aureus, ratificando os resultados para 336 das338 amostras identificadas por meio da chave fenotípica simplificada. Observou-se elevada concordância (98,83%) entre os resultados dos testes genotípicos e fenotípicos para a identificação de S. aureus, demonstrando a aplicabilidade da chave de identificação proposta para a discriminação deste microrganismo entre SCP isolados de casos de mastite bovina.
