Archives of Razi Institute (May 2009)
شناسایی ویروس آبله گوسفندی و بزی به وسیله واکنش زنجیره‌ای پلیمراز بر اساس ژن P32
Abstract
ویروس آبله گوسفندی و ویروس آبله بزی در جنس کاپری پاکس از خانواده پاکس ویریده قرار دارند. آبله گوسفند و بز و اکتیمای مسری (جنس پاراپاکس ویروس) در زمره بیماری‌های بومی ایران محسوب می‌شوند. تائید آزمایشگاهی کاپری پاکس بر اساس تکنیکهای ویرولوژیک و سرولوژیک وقت‌گیر و پر زحمت بوده و اکثر آنها به علت ارتباط آنتی ژنیک بین کاپری پاکس ویروس و پاراپاکس ویروس اختصاصیت کمی از خود نشان می‌دهند. هدف از این مطالعه راه اندازی تکنیک واکنش زنجیره‌ای پلیمراز اختصاصی کاپری پاکس ویروس می‌باشد که به کمک آن بتوان آبله گوسفند و بز را بر اساس قطعه bp 390 از ژن P32 شناسایی کرد. ژن P32 آنتی ژن غالب ایمنی کاپری پاکس ویروس را کد می‌کند. واکنش زنجیره‌ای پلیمراز با استفاده از 2 سویه استاندارد آبله گوسفندی و بزی و 4 ایزوله فیلد جداسازی شده در سوپرناتانت کشت سلولی اپتیمایز گردید. هویت محصول واکنش زنجیره‌ای پلیمراز به وسیله آنالیز سکانس تایید و حساسیت واکنش زنجیره‌ای پلیمراز به وسیله رقت‌های سریال ده‌تایی DNA ژنومی سلول LK آلوده به کاپری پاکس ویروس تعیین شد. تعداد 29 نمونه بیوپسی از اندام‌های داخلی دام های مشکوک به آبله گوسفندی و بزی در مقابل 6 نمونه بیوپسی مشکوک به اکتیمای مسری مورد آزمایش قرار گرفت. تعداد 25 نمونه آبله گوسفندی و بزی مثبت و همه نمونه های اکتیمای مسری منفی بودند. واکنش زنجیره‌ای پلیمراز راه‌اندازی شده در ردیابی DNA کاپری پاکس ویروس حساسیت بالا و در افتراق کاپری پاکس ویروس از پاراپاکس ویروس اختصاصیت خوبی را نشان داد.
Keywords
