VALIDAÇÃO DA TÉCNICA DE FISH EM IMPRINT DE BIÓPSIA DE NEOPLASIAS HEMATOLÓGICAS

Abstract

Validar a técnica de hibridização in situ por fluorescência (FISH) em imprint de biópsias de vários materiais com suspeita de neoplasias hematológicas. Lâminas de imprint procedentes de 17 amostras de tecido (12 de linfonodos, uma de tecido muscular, uma de massa mediastinal, uma de parede torácica, uma de tireoide e um de pulmão) com suspeita de linfomas e sarcoma mieloide, foram preparadas durante o exame de congelação ou durante avaliação de representatividade das amostras, por médicos patologistas (centro cirúrgico) ou radiologistas intervencionistas. As lâminas foram enviadas a seco, sem necessidade de fixador tecidual ao laboratório de citogenética. Foram preparadas 4 a 5 lâminas para cada biópsia. Uma lâmina por caso foi corada corante Rosenfeld e as demais foram armazenadas em temperatura ambiente, com realização da técnica de FISH em até 90 dias. Foram utilizadas sondas especificas para amostra em suspensão celular. Sonda IGH breakapart foi utilizada em todos os casos e duas amostras foram complementadas com sondas CMYC, BCL2 e BCL6 breakapart . A leitura total de 100 núcleos por dois analistas foi feita em microscópio de fluorescência (validação de referência previamente estabelecidos em medula óssea). A hibridização foi bem-sucedida em todas as amostras. Quatro das 6 amostras com diagnóstico LNH-B apresentaram rearranjo do IGH, sendo 2 com rearranjos de CMYC e BCL2 (LDGCB double hit). Em um caso de LNH-T e neoplasia indiferenciada observou-se ganho do sinal IGH . Dois casos de Linfoma de Hodgkin, 2 timomas, 3 proliferações linfoides reacionais e 2 amostras de sarcoma mieloide mostraram estudo de FISH IGH normal. O FISH em material parafinado é uma técnica útil, porém dependente de fatores pré analíticos como tipo de fixação a que o material foi submetido (formalina), além da parafinização do tecido e limitado pela menor variedade de sondas comerciais. Este estudo validou a técnica de FISH em imprint de vários tecidos a partir de aspectos citológicos, mostrando-se de fácil realização, leitura e interpretação, sendo uma opção rápida e útil para fins diagnósticos.