ELISA r-p24: desenvolvimento e validação de um ensaio imunoenzimático para o diagnóstico de infecções causadas pelo Vírus da Imunodeficiência Felina

Abstract

O Vírus da Imunodeficiência Felina (FIV) é um lentivírus que afeta gatos em todo o mundo. A detecção do anticorpo para proteína do capsídeo viral de 24 kDa (p24) é a forma mais comum para diagnosticar infecções pelo FIV. No Brasil, o ensaio comercial mais utilizado no diagnóstico FIV é um teste rápido de ELISA (SNAP® test), baseado no princípio de fluxo lateral, com alta sensibilidade e especificidade. No entanto, o alto custo deste ensaio importado inviabiliza não só o diagnóstico da infecção, como também sua epidemiologia. O objetivo deste trabalho foi aperfeiçoar e validar um teste de ELISA indireto, com tecnologia nacional, utilizando o antígeno recombinante da proteína p24 (r-p24), com sensibilidade e especificidade comparáveis às dos testes rápidos, comercialmente disponíveis. Vinte e seis amostras de soro gatos (13 negativos e 13 positivos para FIV), previamente analisados por PCR e Snap®, foram utilizadas como amostras de referência para aperfeiçoar o ELISA e 226 amostras de soro de gatos, de proprietários privados ou de abrigos da área metropolitana Rio de Janeiro foram utilizadas para validar o ensaio. O ELISA r-p24 apresentou uma sensibilidade de 95,4% e 99,4% de especificidade quando comparadas às do teste SNAP Combo, uma precisão de 99% e um índice Kappa de 0.96. Nossos resultados indicam que o ELISA r-p24 apresentou sensibilidade e especificidade comparáveis às dos testes rápidos, utilizando tecnologia nacional para diagnóstico, pesquisa e estudos epidemiológicos do FIV.

Keywords

• Fiv
• ELISA r-p24
• felinos
• validação