Acta Veterinaria (Jun 2015)
Investigation of Biofilm Formation and Phylogenetic Typing of Escherichia Coli Strains Isolated from Milk of Cows with Mastitis / Ispitivanje Formiranja Biofilma I Filogenetska Tipizacija Sojeva Escherichia Coli Izolovanih Iz Mleka Krava Sa Mastitisom
Abstract
Escherichia coli je oportunistički patogen za mlečnu žlezdu krava koji uglavnom izaziva prolazne infekcije, ali je od nedavno poznato da pojedini sojevi imaju sposobnost adhrencije i internalizacije u epitelne ćelije, što može rezultirati perzistencijom patogena u tkivu i pojavom rekurentnih mastitisa. Mehanizam adaptacije E. coli na mlečnu žlezdu uključuje strukture koje su glavne komponente ekstracelularnog matriksa i čija je ekspresija varijabilna osobina među izolatima: curli fi brije (proteinska komponenta) i celuloza (polisaharid). U ovom radu je ispitana sposobnost ekspresije curli fi mbrija i celuloze (preko morfotipa kolonija na Congo Red agaru) i produkcije biofi lma (testom na mikrotitracionim pločama) kod 25 sojeva E. coli izolovanih iz mleka krava sa kliničkim mastitisom. Izolati su fi logenetski grupisani na osnovu detekcije PCR produkata: chuA, yjaA i TspE4-C2. Osetljivost na antibiotike ispitana je standardnim disk difuzionim testom. Produkcija obe komponente ekstracelularnog matriksa ustanovljena je kod 56%, a ekspresija curli fi brija kod 64% izolata E. coli. Svi izolati koji su produkovali curli fi mbrije su ovu osobinu ispoljili na temperaturi od 37oC, što ukazuje na mogući značaj ovih adhezivnih struktura u patogenezi mastitisa. Rezultati fi logenetske tipizacije su potvrdili da su sojevi E. coli izolovani iz mleka krava sa mastitisom tipični komensali i da u najvećem procentu pripadaju fi logenetskim grupama A i B1. Svi curli i curli/celuloza produkujući izolati formirali su biofi lm in vitro. Biofi lm može imati važnu ulogu u razvoju perzistentih infekcija, kao i recidivu kliničkih simptoma nakon antibiotskog tretmana, uprkos dobre osetljivosti uzročnika na antibiotike in vitro.
Keywords