EFEITO CITOTÓXICO DOS COMPOSTOS DE COORDENAÇÃO SOBRE CÉLULAS DE LINHAGEM DE LINFOMA DE BURKITT

Abstract

Objetivos: O linfoma de Burkitt é uma neoplasia hematológica, caracterizada pela expansão clonal de células B no centro germinativo dos gânglios linfáticos. A resistência aos quimioterápicos é a principal causa de falha nos tratamentos, além das terapias atuais apresentarem alta toxicidade, o que dificulta o uso em pacientes idosos e imunocomprometidos. Dessa forma, destaca-se a importância da investigação de novos compostos que diminuam esses efeitos indesejáveis. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade citotóxica de compostos de coordenação de platina (II) e cobre (II) sobre células de linhagens de linfoma de Burkitt (LB). Materiais e métodos: Para a avaliação da citotoxicidade dos compostos foram realizadas curvas de concentração e tempo resposta em células de linhagem de LB (Daudi) pelo método do MTT. Para isso, as células foram incubadas em diferentes concentrações (1 - 100 μM) e tempos (24, 48 e 72 horas), e a concentração inibitória 50% (CI50) foi determinada por meio de regressão linear. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média. Para avaliação do efeito hemolítico do composto mais citotóxico (composto 3) foram coletadas amostras de sangue periférico em tubos com citrato de sódio 3,2 %. Os eritrócitos foram separados por meio de centrifugação e acrescidos de concentrações crescentes do composto pelo período de 1h, a 37°C. A taxa de hemólise foi calculada de acordo com a quantidade de hemoglobina liberada devido à lise dos eritrócitos. Resultados: Inicialmente, foi avaliado o efeito citotóxico de seis compostos de coordenação sobre células Daudi, dentre os compostos de coordenação, foram selecionados para dar continuidade ao estudo de mecanismo de ação os compostos 3, 4, 6, e 8, pois apresentaram maior citotoxicidade, o estudo teve início com as curvas de tempos e concentrações respostas, para a obtenção da CI50. Nos tempos de 24, 48 e 72h respectivamente, os compostos apresentaram a CI50 de 3,72 ± 0,17 μM, 3,26 ± 0,27 μM, 6,42 ± 0,48 μM para o composto 3. Já o composto 4 apresentou CI50 de 24,51 ± 1,51 μM, 41,68 ± 1,31 μM, 24,71 ± 1,48 μM. O composto 6 apresentou CI50 de 74,05 ±2,70 μM, 10,46 ± 0,40 μM, 5,15 ± 0,46 μM e, por último, o composto 8 apresentou CI50 de 6,90 ± 0,39 μM, 32,14 ± 1,42 μM, 15,37 ± 0,50 μM. Também foi avaliado o potencial hemolítico do composto 3, e os percentuais hemolíticos foram 0,84 ± 0,09% com CI50 de 24h, 0,41 ± 0,12% com 2x CI50 de 24h, 0,85 ± 0,08% com 5x CI50 de 24h, 0,54 ± 0,10% com 7,5 x CI50 de 24h e 0,83 ± 0,13% com 10x CI50 de 24h. Discussão: Os compostos 3, 4, 6 e 8 reduziram a viabilidade das células Daudi de forma dependente da concentração, porém ainda há a necessidade de mais estudos, a fim de esclarecer o tipo de morte celular envolvido na citotoxicidade dos compostos 3, 4, 6 e 8 em células de linhagem de linfoma de Burkitt (Daudi). O composto 3 não causou hemólise, quando comparado ao grupo controle (100% de hemólise), mesmo em concentrações 10 vezes superiores da CI50 dos compostos. Esse resultado pode sugerir que caso o composto venha a ser utilizado como fármaco, poderá ser administrado com segurança por via oral ou parenteral, pois é biocompatível com os eritrócitos. Conclusão: A partir do conjunto de resultados apresentados, sugere-se que o composto 3 é um bom candidato para dar continuidade aos estudos para o desenvolvimento de novos fármacos para o tratamento do LB.