Āsīb/shināsī-i Darmāngāhī-i Dāmpizishkī (Oct 2018)
شناسایی مایکوپلاسما بویس در گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با استفاده از کشت و روش واکنش زنجیرهای پلیمراز بر اساس ژنهای 16SrRNA و uvrC
Abstract
مایکوپلاسما بویس از عوامل اصلی ایجاد پنومونی، ورم پستان و آرتریت مایکوپلاسمائی در گاو میباشد. هدف از این مطالعه، شناسایی مایکوپلاسما بویس در گاوهای مبتلا به ورم پستان بالینی با استفاده از کشت و روش زنجیرهای پلیمراز بود. این مطالعه روی تعداد 328 نمونه شیر گاو مبتلا به ورم پستان بالینی که در طول یک سال به آزمایشگاه مرجع مایکوپلاسمای مؤسسه تحقیقات واکسن و سرمسازی رازی ارجاع میشد، اجرا گردید. نمونهها در دمای 4 درجه سلسیوس و در مدت کمتر از 24 ساعت به آزمایشگاه ارسال و به مدت 24-18 ساعت در 37 درجه سلسیوس انکوبه میشدند و پس از فیلتر شدن به محیط اختصاصی PPLO، در انکوباتور Co2دار به مدت 10-7 روز از نظر رشد پایش میشدند. همزمانDNA نمونهها به وسیله روش فنل- کلروفرم استخراج و خالصسازی شده و از روش PCR برای تشخیص جنس مایکوپلاسما بر اساس ژن 16SrRNA و برای تشخیص گونه بویس از جستجوی وجود ژن uvrC استفاده گردید.از تعداد 328 نمونه، 58 مورد (69/17 درصد) در محیط کشت PPLO مثبت شناخته شدند. از نظر حضور ژن مربوط به جنس مایکوپلاسما، تعداد 97 نمونه (57/29 درصد) مثبت شناخته شدند که از این تعداد، 14 نمونه (26/4 درصد) ژن اختصاصی گونه بویس (uvrC) را نشان دادند.نتایج این مطالعه روش PCR را به عنوان یک تست سریع و قابل اعتماد در شناسایی مایکوپلاسما بویس در نمونههای شیر معرفی کرده و نشان داد که میزان حضور مایکوپلاسما بویس در گلههای شیری در ایران بالا است و میتواند به عنوان یکی از عوامل اصلی مسبب ورم پستان بالینی در گاو مطرح باشد.