Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban (Mar 2025)
紫云英苷调控炎性痛模型小鼠L<sub>4-5</sub>脊髓背角星形胶质细胞自噬与凋亡
Abstract
目的探究紫云英苷(AST)对完全弗氏佐剂(CFA)诱发的炎性痛小鼠L4-5脊髓背角星形胶质细胞自噬及凋亡的影响。方法将24只雄性6月龄C57BL/6小鼠随机分为正常组(control)、生理盐水组(saline)、CFA模型组、CFA+AST组,每组6只小鼠。于小鼠右侧腓骨外踝窝注射10 µL CFA建立炎性痛小鼠模型。saline组小鼠注射等量生理盐水。CFA+AST组小鼠在疼痛造模成功后腹腔注射给药60 mg/kg AST,每日一次,连续给药21 d。采用多重免疫荧光染色法检测各组小鼠L4-5脊髓背角自噬相关因子ATG12、Beclin-1及凋亡相关因子Cleaved-Caspase 3、Caspase 9与星形胶质细胞标志物GFAP的共表达情况;Western blot法检测各组小鼠L4-5脊髓背角自噬相关蛋白ATG12、Beclin-1及凋亡相关蛋白Caspase 3、Caspase 9表达水平。结果免疫荧光染色结果表明,与CFA模型组相比,CFA+AST组小鼠L4-5脊髓背角ATG12(P<0.000 1)、Beclin-1(P<0.000 1)荧光强度增强,Cleaved-Caspase 3(P<0.001)、Caspase 9(P<0.000 1)荧光强度下降,并且AST可抑制星形胶质细胞活化。Western blot结果进一步证实,AST显著上调CFA小鼠L4-5脊髓背角ATG12(P<0.000 1)、Beclin-1(P<0.000 1)表达,并下调Caspase 3(P<0.01)、Caspase 9(P<0.001)表达。结论AST促进CFA小鼠L4-5脊髓背角星形胶质细胞自噬并抑制其凋亡。