ANÁLISE COMPARATIVA DE SUBPOPULAÇÕES DE CÉLULAS RETICULARES (CAR) ABUNDANTES CXCL12 NA MEDULA ÓSSEA DE PACIENTES SAUDÁVEIS VERSUS DE GMSI E MIELOMA MÚLTIPLO

Abstract

Introdução e objetivos: O Mieloma Múltiplo (MM) é um tipo de câncer hematológico resultante do acúmulo de células plasmáticas na medula óssea (MO). A Gamopatia Monoclonal de Significado Indeterminado (GMSI) é uma condição assintomática de células plasmáticas pré-neoplásicas, caracterizada pela presença de uma proteína monoclonal no sangue, que pode progredir para MM. Pesquisas mostram que os Plasmócitos anormais no MM exibem ativação constante da via Wnt canônica, o que leva à proliferação celular, progressão da doença, disseminação e resistência a tratamentos. Mecanisticamente, a atividade oncogênica da via Wnt canônica no MM é atribuída à secreção anormal de R-spondins (RSPOs) na MO, que promovem a estabilização do receptor Wnt na membrana plasmática das células de MM e aumentam sua resposta aos Wnts. Entretanto, o microambiente da MO é heterogêneo e ainda não se sabe qual tipo específico de célula estromal é responsável pela secreção de RSPOs. Considerando que as células CAR são os principais constituintes do nicho hematopoiético e que as células CAR murinas expressam RSPOs, hipotetizamos que essas células seriam a principal fonte de RSPOs na MO humana, contribuindo para a progressão do MM. Portanto, o objetivo deste estudo foi mapear a distribuição das distintas subpopulações de células CAR, identificadas pela expressão diferencial do receptor de leptina (LEPR) e CD56, em amostras de MO de indivíduos saudáveis (com condições ortopédicas sustentáveis) versus pacientes com GMSI e MM. Materiais e métodos: Amostras de MO saudáveis foram coletadas a partir de resíduos ósseos de pacientes submetidos a artroplastia de quadril. Amostras de MM e GMSI foram coletadas de pacientes submetidos a aspiração de MO para exame diagnóstico. A imunofenotipagem foi realizada por citometria de fluxo convencional. Todos os procedimentos foram aprovados (CAAE: 59636622.3.0000.5257). Resultados/Conclusão: A análise de citometria de fluxo de amostras saudáveis de BM (n = 6) revelou a presença de duas subpopulações de células CAR - LEPR+/CD56- e LEPR+/CD56+ - em frequências semelhantes. No GMSI (n = 3), verificou-se uma expansão da população LEPR+/CD56-, acompanhada de uma diminuição do pool LEPR+/CD56+. Quanto às amostras de MM (n = 6), observamos dois perfis de pacientes: um grupo com aumento da fração LEPR+/CD56+ e outro em que essa população estava diminuída. Considerando evidências da literatura que apontam a expressão de CD56 em células do BM como critério de distinção entre MM e GMSI, e correlacionando a expressão de CD56 com a presença de lesões ósseas líticas no MM, nossos resultados sugerem que: (i) o compartimento da célula CAR está alterado em GMSI e MM; (ii) o nível de expressão de CD56 nas células CAR pode servir como critério para estratificar os estágios do MM; (iii) o conjunto LEPR+/CD56+ CAR pode ser a principal fonte de RPSOs que promovem a progressão da MM. Para confirmar essas hipóteses, estão em andamento citometria de fluxo adicional e análise qRT-PCR para avaliar a correlação da expressão de CD56 em células CAR com o estágio de MM e para avaliar a expressão de RSPOs em cada subpopulação de células CAR.