Acta Scientiarum: Technology (Jan 2010)
Produção de lipase por meio de microrganismos isolados de solos com histórico de contato com petróleo = Lipase production by bacterial isolates from petroleum contaminated soil
Abstract
O presente trabalho tem como objetivo apresentar alternativas para a produção de enzimas lipolíticas a partir de microrganismos isolados de solos com histórico de contato com petróleo da região de Sergipe, por fermentação submersa, utilizando o óleo de palma como indutor. Os experimentos foram conduzidos em frascos erlenmeyer de 250 mL, emagitador do tipo shaker (170 rpm), contendo 125 mL (%, w v-1) de KH2PO4, MgSO4.7H2O, NaNO3, extrato de levedura, peptona e amido. O pH foi de 5,0 e 7,0; a temperatura de incubação foi de 30 e 37ºC; o tempo de fermentação, de 24, 48, 72, 96, 120 e 144h; e a proporção de indutor foi de 3 e 4%, adicionado após 72h de fermentação. A determinação da atividade lipolítica foi analisada a 37ºC, num Shaker em banho termostático com agitasção, utilizando goma arábica 7% (p v-1); azeite de oliva e água. As reações foram conduzidas durante 10 min e posteriormente interrompida pela adição de uma solução acetanólica, e titulados com uma solução de KOH (0,04 N), utilizando a fenolftaleína como indicador. A máxima atividade determinada foi de 4369,75 U mL-1 a pH 7,0 e temperatura de 37ºC, com a porcentagem do indutor óleo de palma a 4%. This paper aims to present alternatives to the production of lipolytic enzymes from microorganisms isolated from soil with a history of contact with oil from the region of Sergipe, by submerged fermentation using palm oil as inducer. The experiments were conduced in 250 mL Erlenmeyer flasks in a shaker (170 rpm), containing 125 mL (%, w v-1)of KH2PO4, MgSO4.7H2O, NaNO3, yeast extract, peptone and starch. The pH was 5.0 and 7.0; incubation temperature was 30 and 37°C, respectively; fermentation time was 24, 48, 72, 96h, 120 and 144h; and the inducer concentration was 3 and 4%, added after 72h offermentation. The determination of lipolytic activity was examined at 37° C, in a shaker in thermostatic bath with rotation of 82 rpm, using gum arabic 7% (w v-1), olive oil and water. The reactions were conducted for 10 min with agitation and later stopped by the addition of an acetone:ethanol:water solution, where released fatty acids were titrated with a solution of KOH (0.04 N), using phenolphthalein as an indicator. The maximum activity was determined as 4369.75 U mL-1 pH 7.0 and a temperature of 37°C, with the percentage of the inducer oil palm to 4%.
