خاموشی ژن سم زدای CYP6CM1 در سفیدبالک پنبه (.Gennadius) Bemisia tabaci با استفاده از تکنیک RNAi

Abstract

سفیدبالک (Gennadius.)Bemisia tabaci یکی از مهمترین آفات گیاهان زراعی و محصولات زینتی در جهان است و مشاهده شده است که قابلیت مقاوم شدن به بسیاری از گرو ه‌های حشره‌کش‌ها را دارد. این آفت توانایی بروز مقاومت به گروه‌های مختلف حشره­کش از جمله نئونیکوتونوئیدها را دارا می­باشد.در مطالعه­ی حاضر تاثیر استفاده از تکنیک خاموشی ژن (RNAi) ژن CYP6CM1 به عنوان یکی از اصلی‌ترین ژن‌های مسئول بروز مقاومت به نئونیکوتینوئیدها روی سطح نسبی بیان، اندازه مقاومت و میزان فعالیت آنزیم سیتوکروم P450 در دو جمعیت سفیدبالک پنبه مقاوم و حساس در برابر حشره‌کش ایمیداکلوپرید مورد ارزیابی قرار گرفت.کلنی جمعیت­های سفیدبالک پنبه روی برگ‌های گیاه گوجه و در اتاقک رشد پرورش یافت. RNA دو رشته‌ای ژن CYP6CM1 با استفاده از پرایمرهای اختصاصی سنتز شد و آزمایشات زیست‌سنجی پس از وارد کردن dsRNA به داخل بدن حشره از طرق دریافت دهانی و با محاسبه مقدار LC50 و نسبت مقاومت با استفاده از نرم افزار کامپیوتری Ploplus انجام شد. اندازه‌گیری فعالیت مونواکسیژناز نیز با استفاده از زیر نهشت 7- اتوکسی کومارین انجام شد. آنالیز داده‌ها نشان داد که تغذیه دهانیdsRNA به طور موثری میزان سطح بیان نسبی ژن CYP6CM1 (2 برابری)، اندازه مقاومت (3/5 برابری) و میزان فعالیت آنزیم سیتوکرومP450 (45 درصدی) را در جمعیت مقاوم تغذیه‌شده باCYP6CM1dsRNA کاهش داد. کاهش چند برابری اندازه مقاومت بیانگر امکان استفاده عملی از تکنیکRNAi در مدیریت مقاومت B. tabaci می‌باشد.

Keywords

• bemisia tabaci
• ایمیداکلوپرید
• مقاومت به حشره‌کش‌ها
• خاموشی ژن
• cyp6cm1dsrna