Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical (Oct 2011)
Restriction enzyme analysis of the human cytomegalovirus genome in specimens collected from immunodeficient patients in Belém, State of Pará, Brazil Análise de restrição enzimática do genoma viral do citomegalovírus humano em espécimes clínicos de pacientes imunodeficientes, Belém, Estado do Pará
Abstract
INTRODUCTION: Human cytomegalovirus is an opportunistic betaherpesvirus that causes persistent and serious infections in immunodeficient patients. Recurrent infections occur due to the presence of the virus in a latent state in some cell types. It is possible to examine the virus using molecular methods to aid in the immunological diagnosis and to generate a molecular viral profile in immunodeficient patients. The objective of this study was to characterize cytomegalovirus genotypes and to generate the epidemiological and molecular viral profile in immunodeficient patients. METHODS: A total of 105 samples were collected from immunodeficient patients from the City of Belém, including newborns, hemodialysis patients, transplant recipients and HIV+ patients. An IgG and IgM antibody study was completed using ELISA, and enzymatic analysis by restriction fragment length polymorphism (RFLP) was performed to characterize viral genotypes. RESULTS: It was observed that 100% of the patients had IgG antibodies, 87% of which were IgG+/IgM-, consistent with a prior infection profile, 13% were IgG+/IgM+, suggestive of recent infection. The newborn group had the highest frequency (27%) of the IgG+/IgM+ profile. By RFLP analysis, only one genotype was observed, gB2, which corresponded to the standard AD169 strain. CONCLUSIONS: The presence of IgM antibodies in new borns indicates that HCMV continues to be an important cause of congenital infection. The low observed genotypic diversity could be attributed to the small sample size because newborns were excluded from the RFLP analysis. This study will be continued including samples from newborns to extend the knowledge of the general and molecular epidemiology of HCMV in immunodeficient patients.INTRODUÇÃO: O citomegalovírus é um betaherpesvírus oportunista, causador de infecções persistentes e graves em pacientes imunodeficientes. As infecções recorrentes ocorrem devido à presença do vírus em estado de latência, em alguns tipos celulares, o que possibilita a pesquisa viral por métodos moleculares para auxiliar nos diagnósticos imunológicos, assim como traçar o perfil epidemiológico e molecular viral em pacientes imunodeficientes. O objetivo deste estudo foi caracterizar os genótipos de citomegalovírus e traçar o perfil epidemiológico e molecular viral em pacientes imunodeficientes. MÉTODOS: Um total de 105 amostras foi coletado de pacientes imunodeficientes da Cidade de Belém, incluindo recém-nascidos, hemodialisados, transplantados e pacientes HIV+. Foi realizada a pesquisa de anticorpos IgG e IgM pelo método ELISA e análise enzimática pelo método restriction fragment length polymorphism (RFLP) para caracterização dos genótipos virais. RESULTADOS: Foi observado que 100% dos pacientes apresentavam anticorpos IgG, 87% eram IgG+/IgM-perfil de infecção pregressa; e 13% IgG+/ IgM+ sugestivo de infecção recente. O grupo dos recém-nascidos apresentou maior frequência (27%) do perfil IgG+/IgM+. Na análise por RFLP, foi observado um único genótipo, o gB2, que corresponde ao padrão genotípico da cepa AD169. CONCLUSÕES: A presença de anticorpos IgM nos recém-nascidos indica que o vírus CMV continua sendo causa importante de infecção congênita; a baixa diversidade genotípica pode ser atribuída ao tamanho amostral devido a exclusão dos recém-nascidos na análise por RFLP. Esse estudo será continuado incluindo amostras de recém-nascidos a fim de contribuir para um amplo conhecimento da epidemiologia geral e molecular do citomegalovírus em pacientes imunodeficientes da Cidade de Belém.
