Detección de mutaciones en el gen KRAS por PCR en tiempo real en pacientes con adenocarcinoma colorrectal

Abstract

El carcinoma de colon y recto (CCR) es la tercera neoplasia más común en el mundo. En Colombia el CCRes la cuarta neoplasia más prevalente con una tasa de incidencia del 8.2 por cada 100.000 en hombres y del 11.6 por cada 100.000 en mujeres. La vía de señalización del EGFR ha sido el centro del desarrollo de nuevas dianas moleculares, ya que se sobreexpresa en el 80% de los casos de CCR. Cetuximab (Merck), es un anticuerpo monoclonal que se une específicamente al EGFR bloqueando su fosforilación con una actividad efectiva como terapia de primera y segunda línea para el CCR metastásico, solo o en combinación con terapia tradicional. El gen Kras(12p12.1) codifica una proteína implicada en la transducción de señales activada por EGFR. Kras adquiere una actividad GTPasa constitutiva al estar mutado el gen (principalmente en codones 12 y 13), que conlleva a una pérdida de la regulación de la proliferación celular y a la trasformación tumoral del tejido. En un período de 6 meses, se realizó un estudio para detectar las mutaciones más frecuentes en el gen Kras, en una población total de 124 pacientes, provenientes de 4 regiones geográficas, con diagnóstico de CCR metastásico, y un promedio de edad de 55 años. Se evaluaron 7 mutaciones, en los codones 12 y 13 del gen Kras, en ADN extraído de muestras de tejido de resección tumoral. La detección de mutaciones se realizó mediante PCR en tiempo real usando el kit DxS Thera Screen®, y el programa LightCycler®Adapt software v1.1 en el sistema LightCycler® 480 II. La sensibilidad de este kit detecta hasta un mínimo del 1% de mutaciones presente en cada muestra. Los resultados obtenidos se analizaron utilizando IBM SPSS Statistics 18. Se detectaron mutaciones en el gen Kras en 59 pacientes (48%), siendo las mutaciones más frecuentes Gly12Asp (36%) y Gly12Val (25%). No se encontró asociación estadísticamente significativa entre las mutaciones y la región geográfica (p=0.76), el sexo p=0.85 IC(0.42-1.75), ni la edad. El 33% de los pacientes estudiados eran menores de 50 años, y aunque no existe una asociación significativa entre el porcentaje de casos con mutación y el grupo etario p=0.6 I.C. (0.283-1.356); el porcentaje que representa este grupo dentro del total, confirma la tendencia global de incremento de CCR en esta población. La detección de mutaciones en el gen Kras utilizando la técnica de PCR-RT es una herramienta valiosa en el direccionamiento del tratamiento del CCR metastásico.