همجوشی و تعیین توالی ژن حاصله از همجوشی M2e ویروس آنفلونزا با قسمت انتهائی ژن HSP70 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

Abstract

پروتئینM2 ویروس آنفلونزای تیپA ، پروتئینی با 97 اسید آمینه و پایدار می باشد و بعلت اینکه فقط قسمت خارجی آن ((M2e که دارای 24 اسید آمینه است در معرض سلولهای ایمنی قرار می‌گیرد و بعلت کوچکی نمی‌تواند ایمنوژن خوبی باشد. لذا در این تحقیق با طراحی پرایمر اختصاصی و دارای سایت برشی انتخابی، ژن M2e از ویروس آنفلونزا و HSP70 از مایکوباکتریوم توبرکلوزیس بطور مجزا تکثیر گردیدند و بکمک تکنیک مولکولی و هضم آنزیمی ژن M2e به ابتدای ناحیه ادجونتی HSP70 (heat shock protein)همجوش و در قالب یک ORF تکثیر و به داخل شاتل وکتور بیانی pPICZA کلون گردید. تعیین توالی ژن همجوش شده و مقایسه آن با سایر توالیهای مربوطه در بانک ژن نشان داد که ناحیه ای از M2e ( اسید آمینه 9-2)که به عنوان یک اپی توپ محافظتی عمل می‌کند در بین تمام جدایه‌های موجود از ویروس آنفلونزا یکسان می‌باشد. به نظر می‌رسد که همجوشی پروتئین M2e-HSP70 را بتوان به عنوان کاندیدی در جهت تولید واکسنهای نوترکیب وسیع الطیف بر علیه کلیه سویه‌های ویروس آنفلونزا تیپ A پس از ارزیابی تاثیرات ایمنوژنسیتی و پروتکتیویتی آن حیوان مدل مطرح نمود.

Keywords

• آنفولانزای طیور
• همجوشی
• واکسن
• HSP70
• M2e