Rapid detection by transmission electron microscopy of mycoplasma contamination in sera and cell cultures Detecção rápida da contaminação por micoplasmas de soros e culturas celulares por meio da microscopia eletrônica de transmissão

Abstract

Transmission electon microscopy has been employed for the rapid detection of mycoplasma in sera and cell cultures. High speed centrifugation of sera or low speed centrifugation of cell debris, followed by negative staining of the resuspended pellet, detected mycoplasma contamination more frequently than a culture method followed by direct fluorescence (DAPI), which was used as a control procedure. The appearance of the mycoplasma cell border and content gives some information about particle viability.Para detecção de micoplasmas em soros e culturas de células foi aplicada a microscopia eletrônica de transmissão. Os soros foram centrifugados em alta rotação, enquanto que aos detritos celulares aplicou-se uma centrifugação mais lenta. Os sedimentos ressuspendidos foram preparados por meio de contrastação negativa. Por esta técnica detectou-se contaminações por micoplasmas com maior freqüência do que pela aplicação do corante fluorescente direto (DAPI) em culturas celulares com micoplasmas, servindo de controle. A aparência das bordas celulares dos micoplasmas e de seu conteúdo fornece alguns dados sobre a viabilidade das partículas.

Keywords

• micoplasmas
• contraste negativo
• método rápido
• contaminação de osso e células
• mycoplasmas
• negative contrast
• rapid method
• sera and cell contamination