Blood culture as a parameter of treatment effectiveness in experimental histoplasmosis of the hamster Hemocultivos como parametro de la eficacia del tratamiento de la histoplasmosis experimental en hamster

Abstract

The aim of this study was to determine the value of blood culture as a parameter of treatment effectiveness in experimental histoplasmosis. A total of thirty five hamsters, weighing approximately 120g, were inoculated intracardiacly with 0.1 ml of a suspension containing 4 x 10(7) cells/ml of the yeast phase of H. capsulatum. Treatments were started one week after the infection and lasted for 3 weeks. The azoles, (itraconazole, saperconazole and fluconazole) were administered once a day by gavage, at a dose of 8 mg/kg; Amphotericin B was given intraperitonealy every other day at a dose of 6mg/kg. Blood samples (1 ml) were obtained by heart punction from the 4th day after infection and were seeded in Sabouraud honey-agar and BHI-agar. The hamsters that survived were killed one week after treatment completion and the following criteria were considered for treatment evaluation: 1) rate of spontaneous death, at the end of the experience; 2) microscopic examination of Giemsa smears from liver and spleen and 3) determination of CFU in spleen cultures. Amphotericin B was the most effective drug, with negative blood cultures at day 20, negative spleen cultures in all cases and all the animals survived until the end of the study. Fluconazole was the less effective drug, blood cultures were positive during the whole experience, spleen cultures showed a similar average of CFU when compared with the control animals and 42.8% of these animals died. Saperconazole and itraconazole showed a similar activity, with survival of all hamsters and negative blood cultures at 23 and 26 days respectively. Blood culture seems to be valuable parameter for treatments' evaluation in experimental histoplasmosis of the hamster.El propósito de esta investigación fue determinar el valor de los hemocultivos para juzgar la eficacia de los tratamientos en la histoplasmosis experimental. Treinta y cinco hamsters fueron inoculados por via intracardíaca con 0.1 ml de una suspensión de la fase levaduriforme del H. capsulatum equivalente a 4 x 10(7) células/ml. Los tratamientos comenzaron 1 semana después de la infección y se mantuvieron durante 3 semanas. Los compuestos azólicos, itraconazol, saperconazol y fluconazol se administraron por gastroclisis, una vez al día, a razón de 8mg/kg de peso; la anfotericina B fue aplicada por via intraperitoneal día por medio, en dosis de 6mg/kg. Se obtuvieron muestras de sangre para hemocultivo (1 ml) a partir del 4º día post-infección y se sembraron placas de agar-miel de Sabouraud y agar infusión de cerebro y corazón. Los animales que sobrevivieron fueron autopsiados y se tomaron en consideración los siguientes parámetros: 1) tasa de muertes espontáneas al finalizar la experiencia; 2) resultados de los exámenes microscópicos de extendidos de hígado y bazo teñidos com Giemsa y; 3) UFC en cultivos de bazo. La anfotericina B fue la droga más eficaz, los hemocultivos de los animales tratados fueron negativos a partir del 20º dia de tratamiento, se negativizaron los cultivos de bazo y la totalidad de los hamsters sobrevivió. El menos eficaz fue el fluconazol que no modificó los resultados de los hemocultivos y los cultivos esplénicos y se registró el 42.8% de muertes espontáneas durante el estudio. Saperconazol e itraconazol exhibieron una eficacia similar, no se observaron muertes en los animales tratados y los hemocultivos se negativizaron a los 23 y 26 dias de tratamiento respectivamente. Los hemocultivos resultaron ser útiles como criterio para evaluar la eficacia terapéutica de las drogas antifúngicas en este modelo experimental de histoplasmosis.

Keywords

• Histoplasmosis
• Blood culture
• Experimental model
• Azoles
• Amphotericin B
• Treatment