بررسی میزان بیان ژن پمپ افلاکس norB در سویه‎های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم در برابر سیپروفلوکساسین

Abstract

امروزه مقاومت آنتی بیوتیکی عفونت استافیلوکوکی هم در بیمارستان‌ها و هم در محیط جامعه به یک مشکل اساسی تبدیل شده است. هدف ازاین مطالعه بررسی میزان بیان ژن norB در ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به کینولون جدا شده از نمونه‎های بالینی در شهر قم می باشد. ایزوله‌های استافیلوکوکوس اورئوس از نمونه‌های مختلف بالینی با روش‌های استاندارد بیوشیمیایی و کشت بدست آمد. در ادامه با استفاده از تکنیک Multiplex PCR حضور ژن‎‎های femA به عنوان تشخیص مولکولی استافیلوکوکوس ارئوس، norB به‌ عنوان ژن هدف و rpoD بعنوان رفرنس ژن مورد بررسی قرار گرفتند. الگوی مقاومت آنتی‌بیوتیکی با استفاده از روش استاندارد دیسک دیفیوژن و حداقل غلظت مهاری آنتی بیوتیک سویه‎های جدا شده با روش میکرودایلیوشن تعیین شد. میزان بیان ژن norB با استفاده از روش‎ Real-Time PCR اندازه گیری شد. از240 نمونه بالینی جمع آوری شده، تعداد 82 سویه استافیلوکوکوس اورئوس با روش‌های استاندارد بیوشیمیایی و کشت جداسازی شد. با بررسی مولکولی، حضور همزمان ژن‌های femA، norB، rpoD در 40 ایزوله (78/48 درصد) تائید شد. همچنین با بررسی الگوی آنتی‌بیوتیکی تعداد 26 سویه مقاوم به سیپروفلوکساسین شناسایی شدند. نتایج بدست آمده از تکنیک Real Time PCR نشان‌دهنده افزایش بیان ژن norB در میان سویه‎های مقاوم به سیپروفلوکساسین بود. با توجه نتیجه بدست آمده پمپ افلاکس norB در ایجاد مقاومت به سیپروفلوکساسین نقش اساسی دارد و بررسی حضور این ژن می تواند در پیشنهاد الگوی درمانی حائز اهمیت باشد.

Keywords

• استافیلوکوکوس اورئوس
• پمپ افلاکس
• ژن norb
• سیپروفلوکساسین
• real-time pcr