Evidenciação de vírus patogênicos humanos em filés de peixe Detection of pathogenic virus in fish fillets

Abstract

Foi desenvolvido método para a evidenciação de vírus em filés de peixe. Amostras de 50 gramas foram submetidas à agitação mecânica durante 5 min em 200 ml de água bidestilada esterilizada, em pH 7,3-7,5. As substâncias em suspensão foram removidas mediante uma filtração de clarificação. A suspensão clarificada foi em seguida submetida à ultrafiltração através de membrana de alginato de sódio, sendo esta posteriormente dissolvida em 2 ml de citrato de sódio a 3,8%. A suspensão obtida foi, a seguir, centrifugada a 10.000 rpm durante 20 min, a 4°C, adicionando-se ao sobrenadante penicilina, estreptomicina e anfotericina B. O isolamento de vírus foi feito em culturas primárias de células de rim de macaco rhesus, células HeLa e por inoculação em camundongos recém-nascidos. A identificação sorológica levou aos seguintes resultados: de 51 filés de peixe foram isoladas duas estirpes de poliovírus tipo 1, duas de poliovírus tipo 3 e uma de coxsackievírus B4, o que corresponde a uma percentagem de positividade de 9,8%*. A identificação intratípica das quatro estirpes de poliovírus isoladas revelou ser uma delas semelhante e as demais diferentes das estirpes vacinais.The purpose of this study was to develop a method for detection of virus in fish fillets. Samples (50g) of fish fillets were minced and shaken for 5 min with 200 ml of doubled distilled water (pH 7.3-7.5). The mixture was clarified by filtration. This food extract was subjected to filtration through a sterile sodium alginate membrane, which was thereafter dissolved in 2 ml of a 3.8% sodium citrate solution, and centrifuged at 10000 rev/min for 20 min, at 4°C. Penicillin, streptomycin and amphotericin B were added to the supernatant fraction. Virus isolations were done in primary rhesus (Macaca mulatta) monkey kidney cultures, HeLa cultures and newborn mice. Fifty one fish fillets were examined. The agents isolated were: 2 type 1 poliovirus, 2 type 3 poliovirus and one type B4 coxsackievirus, giving an isolation rate of 9.8%. Using the intratypic serodifferentiation for the characterization of the four polioviruses strains isolated from the fish fillets, only one was similar to the vaccine strain, and the three others were classified as non-vaccine like strains.

Keywords

• Vírus patogênicos humanos
• Vírus
• Viruses
• Virus cultivation