Semina: Ciências Biológicas e da Saúde (Oct 2005)
Production of polyclonal antibodies for lectin from Anticarsia gemmatalis hemolymph <br> Produção de anticorpos policlonais para lectina de hemolinfa de Anticarsia gemmatalis
Abstract
The velvet bean caterpillar Anticarsia gemmatalis promotes extensive damage to soybean and is controlled frequently by chemical insecticides. Due to risks to human and animal health as well as the environment, new approaches were developed to A. gemmatalis control such as the bioinsectide Baculoviru anticarsia. The development of resistance in A. gemmatalis populations treated along several generations with B. anticarsia was reported under laboratory conditions. The insects show complex mechanisms against microorganism infection, such as the lectins, that work as recognition molecules. The aim of this work was to develop polyclonal antibodies to A. gemmatalis lectin. The lectin activity in A. gemmatalis caterpillar hemolymph was evaluated using erythrocytes from human, rabbit, mouse, sheep and cow. Only bovine erythrocytes were not agglutinated by lectin. The rabbit erythrocytes showed stronger reactivity (1:512). Therefore the polyclonal antibodies were raised in rabbit immunized with autologous erythrocytes sensitized with lectin. The antibody to lectin showed a titer of 1:8 in immunodiffusion test. In this study we described a simple method for antibody production against hemolymph lectin without expensive purification techniques. A lagarta de Anticarsia gemmatalis promove extensos danos na cultura da soja e seu controle é geralmente baseado na aplicação de inseticidas químicos. Devido aos riscos à saúde humana, animal e ao meio ambiente, métodos alternativos de controle tem sido desenvolvidos como o bioinseticida Baculovirus anticarsia. Há relatos de desenvolvimento de resistência em populações de A. gemmatalis submetidas, em laboratório, ao tratamento com baculovirus durante várias gerações. Os insetos apresentam mecanismos elaborados de proteção contra agentes infecciosos, como as lectinas, que atuam como moléculas de reconhecimento. Assim, o objetivo deste estudo foi desenvolver anticorpos policlonais para lectina de A. gemmatalis. A atividade de lectina de hemolinfa de lagartas de A. gemmatalis foi avaliada frente a hemácias humanas, de coelho, camundongo, carneiro e boi em ensaio de hemaglutinação. Apenas as hemácias de bovino não foram aglutinadas pela lectina. As hemácias de coelho apresentaram maior reatividade com a lectina (1:512) e portanto os anticorpos policlonais foram produzidos em coelho imunizado com hemácias autólogas sensibilizadas com lectina. O anticorpo anti-lectina apresentou título de 1:8 em reação de precipitação em gel. Assim, nesse estudo foi possível produzir anticorpos para lectina de A. gemmatalis sem necessidade de emprego de técnicas dispendiosas de purificação.
