Tecnología en Marcha (Nov 2012)
Implementación de un protocolo para la producción de raíces pilosas (hairy roots) de uña de gato (Uncaria tomentosa) mediante transformación con Agrobacterium rhizogenes Implementation of a protocol for the production of hairy roots of cat’s claw (Uncaria tomentosa) by Agrobacterium rhizogenes mediated transformation
Abstract
Los beneficios para la salud registrados a partir del uso de metabolitos secundarios de la planta llamada uña de gato (Uncaria tomentosa) han generado una fuerte demanda comercial, así como la extracción intensiva de esta especie en los países en los cuales se distribuye, con el consecuente deterioro de este recurso genético en su hábitat natural. Es por eso que resulta necesario implementar protocolos de cultivo de células y tejidos de esta especie, con el fin de lograr la síntesis de los compuestos en forma controlada. La corteza de las raíces es uno de los tejidos en los que se concentra la producción de estos compuestos, razón por la cual la producción de raíces de cabellera (hairy roots) resulta ser una técnica alternativa para la producción a escala de los metabolitos de interés. En este proyecto se implementó un protocolo de agroinfección de microestacas de U. tomentosa utilizando cepas silvestres de Agrobacterium rizhogenes (AR1500 y A4RS), así como el mantenimiento en medio líquido de las raíces pilosas obtenidas. En colaboración con el Laboratorio de Biología Molecular del programa PIPRA (UC Davis), se determinó la eficacia del protocolo de agroinfección, así como el uso de otras herramientas moleculares para la detección de expresión génica, las cuales mostraron resultados satisfactorios en los ensayos de agroinfección, bajo las metodologías establecidas en el proyecto.The beneficial health proper ties registered of secondary metabolites produced by the plant cat’s claw (Uncaria tomentosa) had generated a strong market demand and intensive extraction of this species in the countries where distributed, with the deterioration of this genetic resource in its natural habitat. Because of this, is necessary to implement protocols for cell and tissue culture of this species in order to achieve the synthesis of compounds in a controlled manner.The root bark is one of the tissues where the production of these compounds is concentrated. Because of this,the production of hairy roots becomes an alternative technique for scale production of the metabolites of interest. In this research, a protocol was implemented using agroinfection of U. tomentosa shoot tips with wild strains of Agrobacterium rizhogenes (AR1500 and A4RS) and maintenance of hairy roots obtained. In collaboration with the Laboratory of Molecular Biology of the PIPRA program (UC Davis), we determined the efficacy of this agroinfection protocol and the use of other molecular tools which showed satisfactory results in testing agroinfection under the methodologies established.
