TÉCNICAS DE COLORAÇÃO CROMOSSÔMICA PARA ESTÁGIOS ESPECÍFICOS DA MATURAÇÃO NUCLEAR DE OÓCITOS BOVINOS

Abstract

O presente trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar a eficácia de três técnicas de coloração nuclear de oócitos bovinos nos estágios de vesícula germinativa (VG), metáfase I (MI) e metáfase II (MII). Nestes três estágios de maturação nuclear, os oócitos, sem as células do cumulus, foram fixados em ácido acético:metanol (1:3) em lâminas (fixados em lâmina e corados com lacmóide; FLL) ou placa de petri (fixados em placa e corados com lacmóide; FPL) e corados com lacmóide a 1% em PBS (phosphate buffered saline). Os oócitos foram também distribuídos aleatoriamente a um terceiro grupo, no qual foram fixados em lâmina e corados com Giemsa (fixados em lâmina e corados com Giemsa; FLG). No estágio de VG, a percentagem de oócitos corretamente identificados no tratamento FLL (93,5%) foi significativamente maior do que nos tratamentos FPL (53,1%; χ²9,84; p-0,0017) e FLG (55,2%; χ2=9,03; p=0,0027). No entanto, a proporção de oócitos nos estágios de MI e MII precisamente corados com a técnica FLL (MI 41,7% e MII 41,9%) foram estatisticamente inferiores do que aquelas observadas nos tratamentos FPL (MI 90,0%, χ²13,25; p=0,0003, e MII 92.8%, χ2=12,45, p=0,0004) e FLG (MI 83,3%, χ2=10,69; p=0,0011, e MII 89,7%, χ²=12,24; p=0,0005). Assim sendo, os resultados demonstraram que a eficácia das técnicas de fixação e coloração dos oócitos bovinos depende do estágio de maturação nuclear que está em estudo.

Keywords

• oócitos
• maturação nuclear
• meiose
• bovinos