Revista MVZ Cordoba (Dec 2004)
VALIDACIÓN DE PCR PARA DETECCIÓN DE Listeria monocytogenes EN CARNES CRUDAS DE RES Y POLLO
Abstract
Listeria monocytogenes es un microorganismo zoonótico emergente en la industria de alimentos, resultando degran interés para la salud pública. El objetivo de este trabajo fue validar la técnica de PCR para la detecciónde este microorganismo en carnes crudas de res y pollo. El procedimiento de extracción de ADN fue realizadocon lisozima, proteinasa K y fenol-cloroformo a partir de muestras contaminadas artificialmente. La especificidadde los cebadores LI1 y U1 fue comprobada por la amplificación de una banda de 938pb correspondiente a unfragmento del ADNr 16S; de igual manera los cebadores LF y LR amplificaron una banda del gen hlyA de750pb; lo que permitió la identificación de género (banda 938pb) y especie (banda de 750pb) respectivamente.Las cepas de los otros géneros bacterianos ensayados no amplificaron ninguna de las bandas específicas. Ellímite de detección para la PCR fue de 102 y 104 UFC/gr para carnes de res y pollo respectivamente; el «GoldStandard» reportó 102 UFC/ml para ambos alimentos. La comparación de la PCR vs., el método «Gold Standard»reportó en carne de pollo una concordancia observada de 98.43%, una sensibilidad del 96.9%, una especificidadde 100%, un valor predictivo positivo del 100% y un valor predictivo negativo del 97%; para la carne de restodos los parámetros anteriores fueron del 100%. Estos resultados demostraron la factibilidad de la PCR parael control de calidad de carnes crudas de res y pollo.
