ABCD: Arquivos Brasileiros de Cirurgia Digestiva (Mar 2009)
Efeito da suplementação dietética de arginina na cicatrização das anastomoses colônicas em ratos Effects of oral arginine supplementation on the healing of colonic anastomoses in rats
Abstract
RACIONAL: A arginina, aminoácido condicionalmente essencial, participa de diversos processos fisiológicos, em particular na cicatrização e na função imune. OBJETIVO: Avaliar o efeito da suplementação por via oral da arginina na cicatrização colônica em ratos. MÉTODO: Foram utilizados 47 ratos Wistar machos, adultos, com peso médio de 345,45 ± 8,35g, alocados em gaiolas coletivas em grupos cinco ou seis animais. Todos receberam água e ração ad libitum, pesados a cada dois dias e randomizados para receberem por gavagem suplementação com arginina a 10% (grupo ARG) ou solução de aminoácidos a 10% (grupo AA) de forma isovolumétrica, isocalórica e isonitrogenada (1,5 g/kg/dia) por sete dias antes do procedimento operatório e quatro após. Um terceiro grupo recebeu solução salina isotônica (grupo SSI), isovolumetricamente. Os ratos foram submetidos a duas colônicas término-terminais confeccionadas 3 cm distais à válvula ileocecal e outra 5 cm distais à primeira, em plano único com fio monofilamentar de nylon 5-0, e foram sacrificados no 5º dia de pós-operatório Neste dia, as duas anastomoses foram ressecadas, sendo uma conservada em solução salina para medidas de tração e a outra enviada à anatomia patológica, para análise do colágeno (total, maduro e imaturo), e imunoistoquímica para a pesquisa de miofibroblastos e neovascularização. Foi avaliado o peso corpóreo ao longo do experimento. A análise estatística foi realizada com os testes t de Student e de Mann-Whitney. RESULTADOS: A comparação referente ao peso nos três grupos não evidenciou diferença significativa nos pesos iniciais, mas foi observada diferença entre os finais nos grupos SSI e AA (324,7g vs. 298g, P=0,04). A tensão foi significativamente maior no grupo AA quando comparado ao grupo SSI (0,94kgf/cm² vs 0,67 kgf/cm², P=0,04), mas não em relação ao grupo ARG (0,94kgf/cm² vs 0,70 kgf/cm², P=0,09). Quanto à força máxima de tração observou-se diferença significativa entre o grupo AA e o grupo SSI (0,18kgf vs 0,13 kgf, P=0,04) mas não em relação ao grupo ARG (0,18kgf vs 0,14 kgf, P=0,08). A força de ruptura total evidenciou valor significativamente maior para o grupo AA quando comparado ao grupo ARG (0,10kgf vs 0,06 kgf, P=0,05), mas não em relação ao grupo SSI (0,10kgf vs 0,09 kgf, P=0,54). Não foi observada diferença significativa quanto à concentração dos colágenos subtipo I e III e nem do índice de maturação de colágeno nos três grupos. Não foi observada também diferença significativa em relação à contagem de vasos sanguíneos ou miofibroblastos pela imunoistoquímica entre os três grupos. CONCLUSÃO: A administração de solução contendo 20 aminoácidos se mostrou mais efetiva do que a administração isolada de arginina nas provas de tração das anastomoses colônicas.BACKGROUND: Arginine, a conditionally essential amino acid, participates in various physiological processes, particularly in wound healing and immune function. AIM: To evaluate the effect of oral supplementation of arginine on colonic healing in rats. METHODS: Forty-seven male adult Wistar rats, with an average weight of 345.45 ± 8.35 g were used. They were placed in collective cages in groups five or six animals. All received water and food ad libitum, were weighed every two days and randomized to receive supplementation by gavage with a 10% arginine solution (ARG group) or an isovolumetric, isocaloric and isonitrogenous (1, 5 g / kg / day) 10% amino acids solution (group AA) for seven days before the procedure and four after surgery. A third group received isovolumetric isotonic saline solution (group SSI). All rats were subjected to two end to end colonic anastomoses, one 3 cm distal to the ileocecal valve and another 5 cm distal from the first, in a single layer with monofilamentar nylon 5-0, and were sacrificed at 5 days post-surgery. At sacrifice, both anastomoses were resected, one was kept in a saline solution for traction measurements while the other was sent to pathology for analysis of collagen (total, mature and immature) and immunohistochemistry for the detection of myofibroblasts and neovascularization. We evaluated the body weight throughout the experiment. Statistical analysis was performed using the Student t test and Mann-Whitney test. RESULTS: The comparison of body weight in the three groups showed no significant difference in initial weights, but a difference was observed between the groups SSI and AA in final weight (324.7 g vs. 298g, P = 0.04). The tension strength was significantly higher in the AA group as compared to SSI (0.94 kgf / cm ² vs. 0.67 kgf / cm ², P = 0.04) but not when compared to the ARG group (0.94 kgf / cm ² vs. 0.70 kgf / cm ², P = 0.09). For the maximal tension strength there was a significant difference between the AA group and the SSI group (0.18 vs 0.13 kgf kgf, P = 0.04) but not when compared to the ARG group (0.18 vs 0.14 kgf kgf , P = 0.08). The total rupture strength of showed significantly higher values for the AA group as compared to the ARG group (0.10 vs 0.06 kgf kgf, P = 0.05) but not when compared to the SSI group (0.10 vs 0.09 kgf kgf, P = 0.54). There was no significant difference in the concentration of collagen subtypes I and III and also no difference in the collagen maturation index in the three groups. There was also no significant difference on the number of blood vessels (angiogenesis) or myofibroblasts by immunohistochemistry among the three groups. CONCLUSIONS: The administration of a solution containing 20 amino acids was more effective than arginine alone on the healing of colonic anastomoses in rats.
Keywords
