Utilidad de un método que determina simultáneamente retinol y α-tocoferol en leche materna por cromatografía líquida de alta resolución

Abstract

Objetivo: Reportar la utilidad de un método simplificado con extracción directa de la leche materna y detección por cromatografía líquida de alta resolución en fase inversa, para la cuantificación de retinol y α-tocoferol. Material y métodos: Se empleó un diseño experimental 23 con las variables de temperatura, tipo de solvente y efecto antioxidante, en 2 niveles. Posterior a la extracción de la leche materna, las muestras se saponificaron con hidróxido de potasio-metanol, se extrajeron con éter de petróleo y se secaron y reconstituyeron con etanol. Para establecer las condiciones del sistema cromatográfico se utilizaron columnas microbondapack con detector UV/visible: fase móvil metanol-agua (96:4 v/v), longitud de onda 325 para retinol y 290 nm para α-tocoferol. Resultados: Los parámetros analíticos fueron linealidad: r2 = 0.9955 (retinol), r2 = 0.9808 (α-tocoferol); límites de detección y de cuantificación: 1.1 y 2.7 μg/dL (retinol), 0.9 y 2.3 μg/dL (α-tocoferol); precisión del método: desviación estándar relativa 4.5% intradía y 4.8% entre días (retinol) y 4.9% intradía y 4.1% entre días (α-tocoferol); exactitud: recuperación = 85.8 ± 7.8% para retinol y 98 ± 1.9% para el α-tocoferol. El método permitió cuantificar la concentración de retinol y α-tocoferol eficientemente. Una vez validado el método, se aplicó para la cuantificación de retinol y α-tocoferol en 100 muestras de leche materna. Los valores fueron para retinol 63.9 ± 5.2 y para α-tocoferol 359 ± 115 μg/dL. Conclusión: El método fue selectivo, lineal, preciso, sensible y exacto, características que junto con su sencillez hacen de él un método conveniente para la determinación de retinol y α-tocoferol simultáneamente en leche materna.

Keywords

• Vitaminas liposolubles
• Cromatografía líquida de alta resolución
• Validación
• Retinol
• α-tocoferol
• Leche materna.