Comparasion of polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), immuno-electron microscopy (IEM) and enzyme immunoassay (EIA) for the rapid diagnosis of rotavirus infection in children

Abstract

Detection of rotavirus RNA by polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) proved to be a highly sensitive and rapid diagnostic test. A comparison of this assay with immuno-electron microscopy (IEM) and enzyme immunoassay (EIA) in 245 faeces from children with gastroenteritis revealed complete agreement between the three assays in 238 (97.14%) samples. Among 75 samples positive in at least one of the three assays, negative results were observed in 5 (6.48%) by PAGE, in 6 (6.76%) by EIA and in none by IEM. Silver staining greatly increased the sensitivity of the PAGE assay. We conclude that although IEM remains the most sensitive and rapid rotavirus diagnostic assay, the PAGE technique has many advantages in its favour, including the non-requirement of expensive equipment, the use of only chemically defined reagents and the capacity to distinguish virus subgroup and variants and to detect non-crossreactive rotaviruses which are missed in serological assays.A evidenciação da presença de ácido ribonucleico (ARN) viral por eletroforese em gel de policrilamida (EGPA) foi comprovada como um método altamente sensível e rápido para o diagnóstico de infecções por rotavirus. Uma comparação desta prova com a imunomicroscopia eletrônica (IEM) e com o ensaio imunoenzimático (EIE) no exame de 245 fezes de crianças com gastroenterite revelou completa concordancia entre os três ensaios em 238 (97.14%) amostras. Entre 75 amostras positivas pelo menos em um dos três ensaios, resultados negativos foram observados em 5 (6.48%) por EGPA, em 6 (6.76%) por EIE e em nenhum por IEM. Coloração pela prata aumentou consideravelmente a sensibilidade do ensaio por EGPA. Concluímos que embora a IEM ainda seja a prova mais sensível e rápida para o diagnóstico de infecções por rotavirus, o ensaio por EGPA tem muitas vantagens em seu favor, sendo as principais as de não necessitar equipamentos caros, de empregar exclusivamente reagentes quimicamente definidos, de identificar grupos e variantes virais e de detectar amostras que não possuindo antígenos comuns a maioria dos rotavirus, não são reveláveis por ensaios sorológicos.