INIBIÇÃO DA MET TIROSINA QUINASE NO TRATAMENTO DA LMA: FOCO NO MICROAMBIENTE TUMORAL INFLAMATÓRIO

Abstract

Objetivos: Na leucemia mieloide aguda (LMA), MET, um receptor do fator de crescimento de hepatócitos (HGF), contribui para polarização de macrófagos para um fenótipo M2, os quais têm uma ação imunossupressora e interagem com células leucêmicas, promovendo sua sobrevivência, evasão imune e resistência à quimioterapia. Portanto, analisamos a expressão do gene MET em células de pacientes com LMA e avaliar a contribuição de um inibidor específico de MET, B2000 (Brigham University), para a progressão da leucemia com foco no microambiente (TME) inflamatório. Métodos: Expressão de mRNA de MET foram obtidos do estudo TCGA AML, realizado em células isoladas de 290 pacientes com LMA (idade média de 61 anos). Células mononucleares (MC) de sangue periférico (PB) humano e medula óssea (BM) (n = 10) foram obtidas de doadores saudáveis (HD) e usadas para o isolamento de monócitos. OCIAML3, MOLM13 e BMNC de HD e pacientes com LMA (n = 10) foram tratadas com B2000 e as taxas de apoptose foram avaliadas. Para obter macrófagos derivados de monócitos (MDMs), monócitos foram estimulados com GM-CSF/LPS/IFN-y ou M-CSF/IL-4, para polarização M1 ou M2, e usados em coculturas. BALB/c receberam uma injeção intraperitoneal de lipopolissacarídeo (LPS) e tratados com B2000. As análises foram realizadas por citometria de fluxo. Resultados: Observou-se alta expressão de MET em pacientes FAB M1/M3/M7 (p <,0001). Células leucêmicas (p <,0001) e BMNCs de pacientes com LMA (p <,005) tiveram apoptose aumentada com o tratamento com B2000 sem afetar as HD-BMNC. B2000 aumentou a população clássica de monócitos (p <,001) e causou um aumento de apoptose em células leucêmicas cocultivadas com monócitos (p <,0001). Monócitos pré-tratados com B2000 inibiram a sobrevivência de células leucêmicas (p <,001). Em macerófagos, houve uma população menor de MDMs M2 (CD206+) e aumentada de M1 MDMs (CD80+) após B2000 (p <,0001). Co-culturas de células leucêmicas com MDMs mostraram que a apoptose foi aumentada em células malignas na presença de B2000 (p <,01). In vivo, B2000 aumentou a frequência de monócitos M1 (CD11b+F4/80+CD80+) e diminuiu a de M2 (CD11b+F4/80+CD206+) (p <,05). B2000 restaurou os níveis de linfócitos B (p <,05) e T (p <,05) na MO, baço e sangue periférico. Conclusão: Nossos achados demonstram que ao atuar no TME inflamatório, B2000 representa um importante agente contra neoplasias hematológicas com um novo efeito imunomodulador na redução direta da proliferação de células leucêmicas, bem como na promoção de funções efetoras antitumorais de TAMs. Suporte: FAPESP 2017/21801-2, 2019/25247-5,2021/05320-0; CNPq 303405/2018-0.