Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban (Jan 2018)
血小板源性生长因子-C 蛋白在视网膜光感受器细胞损伤模型中的神经保护作用
Abstract
【目的】探讨血小板源性生长因子-C(PDGF-C)蛋白治疗对视网膜光感受器细胞损伤模型中的神经保护作用。【方法】①检测体外条件下PDGF-C的作用,使用光感受器细胞系661W细胞及原代培养的Pde6brd1 视网膜细胞。在体外培养的661W细胞培养液中加入PDGF-C蛋白或者牛血清蛋白(BSA),分别予以同等强度相同时间长短的紫外线照射,然后做MTT 检测其细胞凋亡状况,检测PDGF-C 蛋白对661W细胞的保护作用。取Pde6brd1小鼠视网膜做原代细胞培养后,在培养液中分别加入PDGF-C蛋白或BSA,相同条件培养后通过免疫荧光染色检测光感受器细胞的生存情况,以检测PDGF-C 蛋白对该原代细胞的保护作用。②检测在体条件下PDGF-C的作用,在Pde6brd1小鼠的视网膜下分别注射PDGF-C蛋白及BSA,然后通过组织切片后苏木精-伊红(HE)染色观察视网膜光感受器细胞数量的变化来检测PDGF-C的神经保护作用。【结果】在紫外线诱导的视网膜光感受器细胞661W 损伤模型中,培养液中加入PDGF-C 蛋白的实验组中,MTT 实验显示490 nm 吸光度(0.2857 ± 0.054)较对照组(0.1726 ± 0.005)增高,P < 0.05。在Pde6brd1原代培养的视网膜细胞中,PDGF-C蛋白组中光感受器细胞的存活率明显高于对照组,P < 0.05。在Pde6brd1小鼠的视网膜下注射PDGF-C蛋白,实验组外核层中的每100 μm细胞计数(38.4769 ± 6.1)较对照组(27.2435 ± 5.3)增加,P < 0.05。【结论】PDGF-C蛋白在光感受器细胞损伤模型中具有较强的神经保护作用。