Brazilian Archives of Biology and Technology (Jan 1999)
Effect of ABA and GA3 on protein mobilization in embryos and cotyledons of angico [Anadenanthera peregrina (L.) speg] seeds during germination Controle da Mobilização de Proteínas pelo ABA e GA3 em Sementes de Angico [Anadenanthera peregrina ( L. ) Speg.] durante a Germinação
Abstract
In this work, a woody species [A. peregrina (L.) Speg.] was studied in order to observe the effect of ABA and GA3 at the biochemical level during the process of seed germination. Embryos incubated in sucrose solution containing ABA and/or GA3 were analyzed through SDS-PAGE to observe the mobilization pattern of storage proteins during the beginning of germination. Cotyledons isolated from seeds incubated in aqueous solutions containing ABA and/or GA3, were also analyzed through SDS-PAGE and by PAGE/Activity Gels (polyacrylamide gels copolymerized with substrate for enzymes) to observe the mobilization pattern of storage proteins and protease activity after the beginning of the germination. Results of these experiments show that ABA blocks protein mobilization by inhibiting protease activity in cotyledons. This inhibition is not sufficient to prevent germination showing that the effect of ABA on germination is not dependent on protease activity. The blockage of storage protein mobilization was also observed in embryos, but no protease activity inhibition was clearly detected. ABA was able to induce the synthesis of proteins in cotyledons but not in embryos. A polypeptide with an approximate molecular weight of 17 kD, was degraded within 6 hours in control embryos, but this degradation was blocked by ABA and GA3. Using the same concentrations of ABA and GA3 on embryos and cotyledons, the effect of ABA was counteracted by GA3 in embryos, but not in cotyledons. Although the effects of ABA and GA3 were not so different from those shown in the literature, the behavior of 17 kD-polypeptide contradicts these reports suggesting that specific studies should be performed.Estudou-se a germinação de uma espécie selvagem sob influência do ABA e GA3. Embriões isolados, incubados em soluções de sacarose contendo ABA e/ou GA3, foram analizados em SDS-PAGE para observar o perfil da mobilização de proteínas de reserva durante o início da germinação. Cotilédones de sementes incubadas em soluções aquosas de ABA e/ou GA3 foram analizados em sds-page e PAGE/Géis de Atividade para observar o perfil da mobilização de proteínas de reserva e atividade de proteases, respectivamente, após o início da germinação. Os resultados indicam que ABA bloqueia a mobilização protéica através da inibição da atividade enzimática em cotilédones, mas não impede totalmente a germinação, parecendo afetar germinação e atividade enzimática independentemente. Em embriões houve bloqueio da mobilização, mas a relação com a inibição da atividade enzimática não foi claramente demonstrada. ABA induziu a síntese de proteínas em cotilédones, mas não em embriões. Um polipeptídeo com 17 kD é degradado em 6 horas nos embriões, mas a degradação é bloqueada por ABA e/ou GA3. Para mesmas concentrações de ABA e GA3, GA3 não inibiu o efeito do ABA em embriões, mas inibiu em cotilédones. Os efeitos do ABA e GA3 não diferiram sensivelmente dos dados correntes, mas o comportamento do polipeptídeo de 17 kD é contraditório e sugere estudos específicos.
Keywords